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目的:抑郁症是一种与严重情绪障碍相关的精神疾病,以其显著的发病率和死亡率而闻名于世,并对现代社会构成重大的健康威胁。虽然过去的50年里抗抑郁药物在已经发展得很好,但是抗抑郁药物仍存在各种各样的副作用,比如性功能障碍、口干、恶心、震颤和失眠。此外,抗抑郁药在抑郁症的治疗中表现出有效率低、起效缓慢、症状缓解不完全、需要长期用药和复发率高等缺点。因此,有必要寻找一种新颖、有效、副作用小的抗抑郁药。广藿香,“十大南药”之一,为唇形科植物广藿香的干燥地上部分。文献报道广藿香有多种有益的治疗作用,比如抗炎,缓解抑郁、压力、平静神经、控制食欲、改善性兴趣和抗抑郁。广藿香油是广藿香的主要药用成分。在芳香疗法中,广藿香油被用于提高性欲,缓解抑郁和压力。广藿香醇(Patchouli alcohol,PA)是广藿香油的主要成分,其含量在广藿香油中最高可占57%。研究表明含有广藿香醇的印度缬草广藿香醇型二氯甲烷提取物具有抗抑郁作用。此外,广藿香醇具有神经保护作用并对东莨菪碱诱导的小鼠认知和记忆障碍具有保护作用。以上研究表明广藿香醇很可能具有抗抑郁作用。此外,先前的研究结果表明广藿香醇毒性作用较低。因此,广藿香醇很可能是一个安全有效的抗抑郁药物。然而,迄今为止尚没有研究报道广藿香醇对抑郁症的治疗效果。因此,本研究采用广泛使用的经典慢性温和不可预知性刺激(Chronic unpredictable mild stress,CUMS)模型探讨广藿香醇的抗抑郁作用及其潜在的作用机制。方法:1.分组:将180-220g的雄性SD大鼠随机分成正常(Vehicle)组,CUMS组,CUMS+fluoxetine 20mg/kg 组,CUMS+PA 10mg/kg 组,CUMS+PA 20mg/kg 组和CUMS+PA 40mg/kg 组。2.造模:正常(Vehicle)组不给予任何刺激,其余SD大鼠单笼饲养,并给予以下刺激:禁水24h,禁食24h,打湿笼子24h,间隔2h光暗交替(持续12h),4℃冰水游泳5min,42℃热水游泳5min,45°倾斜笼子24h,夹尾2min,束缚2h。为了防止习惯化并确保压力源的不可预测性,以上刺激随机给予,并在一周内不重复,持续8周。3.给药:在 8 周的后 4 周,对 CUMS+fluoxetine 20mg/kg 组,CUMS+PA 10mg/kg组,CUMS+PA 20mg/kg组和CUMS+PA 40mg/kg组给予氟西汀和不同浓度的PA治疗,一天一次,灌胃给药,持续4周。4.行为学测试:给药结束后,对各组大鼠进行行为学测试,包括旷场实验,强迫游泳实验和糖水消耗实验,收集数据。5.免疫印迹法(western blot)检测:采用western blot检测CUMS大鼠海马体中磷酸化mTOR,p70S6K和4E-BP-1的表达以及LC3-Ⅱ和p62的表达6.酶联免疫吸附法(enzyme-linked immuno sorbent assay,ELISA)检测:采用ELISA检测CUMS大鼠海马体中PSD-95和SYN-Ⅰ的水平。7.阻断验证:采用雷帕霉素(自噬诱导剂和mTOR通路阻断剂)和氯喹(自噬通量抑制剂)对广藿香醇的抗抑郁机制进行阻断验证。成果:1.广蕾香醇有效改善CUMS引起的大鼠抑郁样行为广藿香醇能有效提高CUMS大鼠旷场实验的crossing值和rearing值;与CUMS大鼠相比,广藿香醇能有效提升大鼠的糖水偏好值,减少大鼠在强迫游泳实验中的不动时间。2.广藿香醇通过激活mTOR信号通路抑制自噬并增大自噬通量。广藿香醇能有效减弱CUMS模型诱导的p-mTOR和p-p70S6K表达水平的下降。与正常组相比,CUMS有效提高了 LC3-Ⅱ和p62的水平,这种提高水平被广藿香醇有效逆转。3.广藿香醇通过激活mTOR信号通路增加突触蛋白的形成。与CUMS大鼠相比,广藿香醇能显著提高大鼠海马体中p-p70S6K和p-4E-BP-1的水平。ELISA试剂盒结果显示,广藿香醇可以有效减弱CUMS模型诱导的大鼠海马体PSD-95和SYN-Ⅰ水平的下降。4.雷帕霉素和氯喹均可有效逆转广藿香醇的抗抑郁作用。行为学测试结果显示,广藿香醇能有效提高CUMS大鼠的crossing值和rearing值,提升大鼠的糖水偏好值,减少大鼠在强迫游泳实验中的不动时间。然而雷帕霉素和氯喹均可逆转广藿香醇的这种抗抑郁样行为。结论:广藿香醇通过激活mTOR信号通路抑制自噬,修复突触和增大自噬通量,在CUMS大鼠中发挥抗抑郁作用。