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背景:随着世界人口老龄化,糖尿病患病人数逐年增加,根据2019年国际糖尿病联盟数据显示,全球20到79岁糖尿病患者已达4.63亿,平均每11人中1人患有糖尿病,预计2045年将突破7亿[1]。长期体内高血糖状态将导致周围血管组织病变,最终导致脏器的衰竭,如糖尿病肾病、糖尿病心脏病和糖尿病眼病等。而在糖尿病患者的死亡人数当中,1/2患者死于心血管并发症[2]。糖尿病心血管疾病主要包括糖尿病心肌病和糖尿病动脉粥样硬化。虽然长期高血糖导致心血管疾病发病机制尚未完全阐明,但大量研究证实心血管细胞内炎症反应、氧化应激和细胞凋亡在糖尿病心血管疾病发病机制中占有重要地位,研究显示,糖尿病患者心血管组织内MAPK和NF-κB大量激活,而降低MAPK和NF-κB能改善炎症反应和细胞凋亡并降低心血管细胞损伤进而改善心脏和血管功能[3-4]。热休克蛋白70羧基末端反应蛋白（The carboxyl terminus of heat shock protein70 interacting protein:CHIP）是E3泛素连接酶的一个成员,首先由Ballinger教授发现于人的心脏cDNA文库,高表达于人心血管系统组织。其N端TPR结构域能与热休克蛋白70/90相互作用而C端U-box结构域具有E3泛素连接酶活性,CHIP独特结构决定其能介导疾病相关蛋白质及错误折叠蛋白质泛素化并降解,从而达到细胞内环境的稳定[5-6]。研究显示,在血管紧张素Ⅱ导致的小鼠心肌重塑模型中,下调CHIP基因加重小鼠心肌细胞炎症反应和凋亡[7],提示CHIP参与炎症发生及细胞凋亡过程。但对CHIP是否参与高葡萄糖介导的血管内皮细胞损伤尚无相关报道。目的:1、CHIP是否参与高糖介导的血管内皮细胞损伤。2、假设CHIP参与血管内皮细胞损伤,探究其涉及分子机制。方法:提取健康孕妇原代脐静脉血管内皮细胞,2-6代用于实验,实验前使用甘露醇排除渗透压影响,重组慢病毒LV-siRNA NC（空载慢病毒）和LV-siRNA CHIP转染原代脐静脉血管内皮细胞,并使用5.5mmol/L（Normal glucose:NG）和25.5mmol/L（High glucose:HG）葡萄糖浓度培养液处理脐静脉血管内皮细胞48h。实验分为四组:NG+siRNA NC、NG+siRNA CHIP、HG+siRNA NC、HG+siRNA CHIP。1、MTT法和Tunel法检测细胞死亡率和凋亡率,2、ELISA试剂盒检测ET-1;3、试剂盒检测SOD活性和NO含量;4、DHE荧光染料检测细胞内ROS水平;5、qRT-PCR检测IL-8,MCP-1mRNA相对表达量;6、Western blot检测CHIP、iNOS、eNOS、NOX2、NOX4、p38、p65、p-p38、p-p65、BAX、BCL-2蛋白质水平。结果:1、与5.5mmol/L糖浓度培养液处理组相比,5.5mml/L糖浓度+20mmol/L甘露醇浓度培养液处理组细胞存活率无统计学差异。2、与NG+siRNA NC组相比,HG+siRNA NC组细胞存活率降低;炎症因子IL-8、MCP-1mRNA表达升高;ET-1分泌增加,NO和eNOS下降而iNOS表达增加;细胞内ROS水平升高,抗氧化能力SOD降低,NOX2、NOX4表达升高;凋亡蛋白BAX表达增加同时BCL-2表达下降,细胞凋亡显著升高;p-p38、p-p65水平升高;3、与HG+siRNA NC组相比,HG+siRNA CHIP组细胞存活率降低;炎症因子IL-8、MCP-1mRNA表达升高;ET-1分泌增加、NO降低而eNOS和iNOS表达无差异;细胞内ROS水平升高,抗氧化能力SOD降低,NOX2、NOX4表达升高;凋亡蛋白BAX表达增加同时BCL-2表达下降,细胞凋亡升高;p-p38、p-p65水平升高;结论:1、高糖可介导原代脐静脉血管内皮细胞炎症反应、氧化应激和细胞凋亡。2、下调CHIP表达加重高糖介导脐静脉血管内皮细胞损伤,其机制可能与调控MAPK/p38和NF-κB/p65活化有关。