钾质粗面岩表生矿物风化芽孢杆菌分离筛选及其功能研究

来源 :南京农业大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:lilac_cs
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本试验以南京小龙山钾矿区不同位点钾质粗面岩及附近土壤样品为材料,通过平板培养的方法筛选不同样品中可培养的芽孢杆菌,研究芽孢杆菌矿物风化能力,以及不同样品中芽孢杆菌种群结构和系统发育关系,并通过qRT-PCR的方法研究不同样品中芽孢杆菌16SrDNA丰度。研究结果为芽孢杆菌在岩石风化、土壤形成及元素循环中的作用提供依据。2014年11月和2015年5月分别从土壤、岩石1、岩石2和岩石3四个位点共分离得到800株芽孢杆菌,2014年11月四个位点芽孢杆菌占总细菌比例分别为6.7%、7.0%、8.6%和11.4%,2015年5月四个位点芽孢杆菌占总细菌的比例分别为6.5%、7.0%、7.4%和9.8%。通过7 d摇瓶试验,分离到的芽孢杆菌从钾长石中释放的A1比对照增加3-18倍。16S rRNA基因序列分析表明,分离的芽孢杆菌隶属于Bacillus cereus、Bacillus aryabhattai、Bacillus anthracis、Bacillus megaterium、Bacillus thuringiensis、Bacillus amyloliquefaciens、Bacillus subtilis、Bacillus aerophilus、Bacillus tequilensis等9个种,其中Bacillu cereus和Bacillus aryabhattai为所有样品共有的种群,2014年11月采集的样品中,土壤样品芽孢杆菌种类最多,其中Bacillusaerophilus和Bacillus tequilensis为其特有的种,5月份采集的样品中,岩石1样品芽抱杆菌种类最多,其中Bacillus amyloliquefaciens为其特有的种,其它样品未发现特有的芽孢杆菌。从每个样品分离得到的芽孢杆菌中筛选一株高效的矿物风化菌株进行15 d动态摇瓶试验,结果显示,所有菌株均能显著降低发酵液pH值且产生葡萄糖酸,葡萄糖酸均在第Id达到最大值(1300-1800 mg L-1);与对照相比,接菌处理发酵液中Fe、AI含量分别提高了 2.3-15倍和10.3-18.8倍,另外,发酵液中Ca和K的含量与对照相比也有明显的提高。为了更好的分析样品中芽孢杆菌丰度,通过细菌通用引物和设计的芽孢杆菌属特有引物进行qRT-PCR,结果表明,土壤样品、岩石1、岩石2和岩石3样品芽孢杆菌丰度分别为1.0%、1.1-1.4%、1.5-1.6%和2.5-2.7%。土壤样品中芽孢杆菌丰度最低,岩石3样品中芽孢杆菌丰度最高。另外,不同时间各样品中芽孢杆菌丰度相近。
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