苏云金芽胞杆菌(Bacillus thuringiensis)是目前世界上使用最广泛的生物杀虫剂之一,为革兰氏阳性细菌,目前已分离到83个亚种,71个血清型。其高效杀虫活性源于杀虫晶体蛋白,该蛋白在稳定期大量表达、积累并装配成晶体。晶体代谢调控机制是目前研究苏云金芽胞杆菌研究的热点之一,因为到目前芽胞形成机制的研究已有了突破性的进展,但是目前关于晶体代谢调控的机制仍然没有一个合理并清晰的解释。本文从高毒菌株YBT1520出发,采用不同的诱变方法得到其晶体的突变株,然后采用2-DE的方法,通过质谱鉴定出蛋白差异的点。希望得到与晶体代谢调控相关的功能基因。1.利用宽氮离子束、紫外线+氯化锂复合诱变、微波+紫外线复合诱变、NTG+氯化锂复合诱变等诱变方法处理苏云金芽胞杆菌YBT1520,筛选得到了三种类型的突变株：晶体变大、晶体变小、无晶体的突变株。2.进行了稳定性传代实验,晶体变小和无晶体的突变株20代传代稳定；抽取YBT1520及突变株的质粒,发现晶体变小的突变株与野生株相比少了pBMB12这个质粒,而无晶体突变株的质粒图谱与野生株有较大的差异；测定了它们的生长曲线,晶体变小的突变株的生长趋势基本和野生株一致,但是无晶体突变株在进入稳定期后生长波动范围较大；测定了野生株和突变株的杀虫活性,结果显示晶体变小的突变株的杀虫活性与野生株相似,而无晶体突变株基本没有杀虫活性。根据突变株的信息以及实验目的,确定以晶体变小的突变株为双向电泳的材料。3.YBT1520晶体的大量表达始于对数期末期,并在稳定期积累装配形成晶体,据此选取14h、18h、22h三个时间点进行2-DE实验,PDQuest软件分析胶图,用质谱鉴定出了可信的表达差异较大的点13个,其中表达量上调的点有8个,下调的点有5个。结果包括：与代谢相关的酶类、伴侣蛋白、转录调节蛋白、翻译调节蛋白和未知功能的蛋白等5类。