AINTEGUMENTA-LIKE（AIL）基因属于AP2/ERF（APELTALA 2/ETHYLENE）转录因子家族成员,调控植物的生长发育和花器官发生。近年研究表明,AILs基因在植物的休眠调控中也发挥着重要作用。杨树的研究中指出,开花调控与休眠调控在植物的信号传递通路中具有一些共用的调控元件。二球悬铃木作为“行道树之王”,在园林应用中占有重要地位,但每年的落果飞毛成为悬铃木在园林绿化中广泛应用的一大难题。目前二球悬铃木开花调控的分子研究较为透彻,而休眠调控的分子研究机制尚不明确。了解Pa AILs基因在开花调控与休眠调控中的生物学功能,可以进一步揭示悬铃木成花及周年生长节律调控的分子机制,为多年生落叶植物的生长发育调控理论提供新的证据。同时研究结论有望指导分子育种策略应用于悬铃木的开花及生长节律调控,提高其园林应用价值。基于此,本研究以二球悬铃木中的AILs同源基因为研究对象,针对其基因结构、表达模式、表达调控及转基因功能等方面展开研究,主要结果如下:1.采集校园内二球悬铃木的一年生枝条进行水培萌发实验发现,水插枝萌芽率在7月中下旬以后开始逐渐减少,8月以后的萌芽率更是极低水平,9月以后几乎无萌发,11月底12月初以后柄下芽才开始慢慢萌发。完成了二球悬铃木营养芽周年样品（2019年7月-2020年2月）中多种激素（ABA、GA、IAA、ZT等）含量测定。结果表明,从7月中下旬开始,自然条件下生长的二球悬铃木营养芽中ABA含量总体呈现下降趋势,直至10月份ABA含量不再有明显变化,一直维持在较低水平;GA3含量则呈现相反趋势,从7月中下旬开始呈现上升趋势;IAA的含量从7月中下旬开始逐渐下降,10月中下旬达到最低值后逐渐升高。结合课题组之前在FT同源基因方面的研究成果,推测自然环境下生长的二球悬铃木在7月中下旬开始转入生态休眠,并向内休眠过渡,9月上旬进入内休眠,11月中下旬开始从内休眠向生态休眠过渡,适宜的条件下便可打破休眠开始生长。2.以不同休眠时期的二球悬铃木柄下芽转录组数据库为参考,筛选出6个有表达差异的ANT-LIKE同源基因。以二球悬铃木c DNA和g DNA为模板克隆得到了Pa AILs序列全长,通过进化树分析、序列比对、内含子外显子结构分析、亚细胞定位（定位于细胞核中）等分析将其命名为Pa AIL1a、Pa AIL1b、Pa AIL5a、Pa AIL5b、Pa AIL7a和Pa AIL7b。通过q RT-PCR分析发现,Pa AILs各基因表达模式相似。Pa AILs主要在幼嫩组织（下胚轴、幼根、花序等）中表达,在成熟组织（叶片、球果等）中表达极低;对其周年表达模式进行分析,发现Pa AILs基因在5月-6月下旬和10月下旬-次年2月表达量相对较高,其他时间低水平表达;对二球悬铃木进行环境因子调控实验,分析表明低温短日照可以上调Pa AILs的表达,Pa AILs对单独短日照条件则不敏感。克隆了Pa AILs的启动子区段,对其顺式元件进行了预测。发现p Pa AILs序列中含有大量的光响应元件、低温响应元件、MADS-box类转录因子特异结合位点CARGCW8GAT以及细胞周期调节元件。酵母单杂交和转录激活实验表明Pa FULs能够直接结合Pa AILs基因的启动子并激活其表达。3.构建了超量表达载体,对模式植物烟草进行异源超量表达实验。Pa AIL5a、Pa AIL5b和Pa AIL7b转基因烟草植株表现为:生长缓慢,叶片叶缘向近轴面严重卷曲、皱褶,花发育异常、花药不开裂,无法正常结实。电镜观察显示,转基因植株叶片表皮细胞于对照相比明显褶皱、扭曲,气孔形态也受到影响;花药细胞与对照相比变得更加扁平。Pa AIL7a转基因植株与对照相比,花期提前将近30 d。Pa AILs还会上调细胞周期相关基因Nt CYCD3;1和Nt CDKB1-1的表达。