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目的:
本课题从加味四逆散治疗慢性疲劳综合征的免疫学研究入手,通过与帕罗西汀组、小柴胡汤组、柴胡龙骨牡蛎汤组、四物汤组、黄芪建中汤组、人参煎液组、牛膝组对照研究,以探讨疏理气机为主治疗慢性疲劳综合征的理论与实验依据,探索加味四逆散防治慢性疲劳综合征的免疫机制,从而为运用疏理气机的方法防治慢性疲劳综合征提供可靠的参考依据,同时研究结果对提高慢性疲劳综合征的中西医诊治水平具有一定的意义。
方法:
SPF级健康成年雌性 Wistar 大鼠 100 只,体重( 180±20) g,正常光照的清洁级动物室中,对大鼠适应性饲养一周,采用随机数字法分组的方法,随机分为10组,每组 10只,分为空白对照组、模型组、加味四逆散组、帕罗西汀组、小柴胡汤组、柴胡龙骨牡蛎汤组、四物汤组、黄芪建中汤组、人参煎液组、牛膝组。空白对照组大鼠每天定点喂食,不予任何应激源刺激;对于其它各组大鼠进行慢性中等强度的应激 35 天,包括强迫游泳(19℃,水深 40cm,大鼠力竭为止),束缚(将大鼠放入自制的束缚瓶中,胶带封闭瓶底,持续 5h)、剥夺睡眠 24h、禁水禁食、夹尾。各组大鼠每 7天称一次体重,每 7天以敞箱实验( Open-Fieldtest)法测定动物行为学的变化,造成气滞型慢性疲劳模型。随后分别按帕罗西汀组以20mg盐酸帕罗西汀片溶于 94ml生理盐水中,加味四逆散组 5.93g/kg、小柴胡汤组 8.47g/kg、柴胡龙骨牡蛎汤组 7.41g/kg、四物汤组 4.23g/kg、黄芪建中汤组10.48g/kg、人参煎液组 1.06g/kg、牛膝组 1.59g/kg,各组均按 1.0ml/100g体重给药,空白对照组和模型组按 1.0ml/100g蒸馏水灌胃, 1次/天,共治疗 21天,实验动物于末次给药后禁食,不禁水,次日取材。通过体重变化、敞箱实验等方法评价模型大鼠行为学指标;采用酶联免疫法( ELISA)测定大鼠血清 IgG和 IgM的量的变化;采用酶联免疫法( ELISA)测定大鼠血清 TNF-α 和 TNF-β 的量的变化。
结果:
每组的结果与空白对照组相比,慢性疲劳模型组大鼠造模过程中体重降低,敞箱实验的大鼠的水平运动次数和垂直运动次数下降,大鼠血清 IgG 和 IgM 的含量明显降低,大鼠血清 TNF-α 和 TNF-β 的含量明显升高,经治疗后,加味四逆散治疗组、帕罗西丁治疗组以及小柴胡汤治疗组可以升高大鼠血清 IgG和 IgM的含量,并可以降低大鼠血清 TNF-α和 TNF-β的含量。
结论:
①慢性不可预见的中高等强度复合应激能诱发大鼠的慢性疲劳状态。
②慢性不可预见的中高等强度复合应激诱发慢性疲劳状态的机制可能与血清中 IgG和 IgM的含量的降低有关,与血清中 TNF-α和 TNF-β的含量的升高有关。
③以疏理气机为主治疗慢性疲劳慢性疲劳综合征有效。
④疏理气机法治疗慢性疲劳综合征的机理可能与调节机体的免疫功能有关;加味四逆散治疗慢性疲劳综合征的机理可能与升高血中 IgG 和 IgM、降低血中TNF-α和 TNF-β的含量有关。