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背景:原发性免疫性血小板减少症(ITP)是一种获得性出血性自身免疫病,其病理过程为免疫功能紊乱使机体血小板加速破坏以及生成障碍,导致血小板数量不足和功能障碍,临床上多以皮肤、粘膜、内脏等出血为主要特征。最初发现B细胞介导的体液免疫异常在ITP的发病过程中起着重要作用,后来的研究发现,除了体液免疫,T细胞介导的细胞免疫也是影响ITP疾病进程的重要因素。Toll样受体家族(TLR)是一类模式识别受体蛋白(PRR),同时能够识别病原体相关分子以及内源性损伤相关分子,是连接固有免疫和适应性免疫的关键因子。TLR4,是一种典型的PRR,主要表达于树突状细胞(DCs)和单核细胞,在巨噬细胞中也常见,通过启动核内转录因子NFκB通路,能够活化免疫细胞和触发促炎性反应。已经有多项研究证实,TLRs参与了某些自身免疫病的病理过程,如多发性硬化症(MS)、系统性红斑狼疮(SLE)、自身免疫性溶血性贫血(AIHA)。同时也有研究表明TLR4在ITP患者的单核细胞中的表达明显增高,而且在儿童ITP血小板表面也存在TLR4表达异常的情况。所以我们推测TLR4在ITP的病理过程中起着重要作用,但关于TLR4+896A/G和TLR4+1196C/T的基因多态性与ITP的研究很少,基于此我们进行以下研究。[目的]本实验是想确定ITP患者中是否存在TLR4+896A/G和TLR4+1196C/T基因多态性,以及其基因多态性的分布情况,进一步研究TLR4+896A/G和TLR4+1196C/T与ITP的发生发展存在的内在机制,从而提供为ITP的临床治疗提供新的思路。[方法]一共入组151例ITP患者和152例健康对照。(1)收集患者临床资料;(2)使用Wizard DNA纯化试剂盒提取ITP患者和正常对照组外周血中基因组DNA;(3)使用PCR方法检测扩增基因组DNA;(4)对扩增后的基因组DNA进行基因测序;(5)数据比较用X2检验或确切概率法,H-W平衡检验,用logit法计算OR值。P<0.05认为具有统计学意义。[结果]1.在ITP实验组和健康对照组中,所有样本的TLR4+896A/G基因多态性位点上没有发现TLR4+896A的突变等位基因TLR4+896G。2.在TLR4+896A/G等位基因上全都是A碱基,没有发现G碱基。基因型全部为纯合子AA,不存在AG和GG基因型。3.在ITP实验组和健康对照组中,所有样本的TLR4+1196C/T基因多态性位点上没有发现TLR4+1196C的突变等位基因TLR4+1196T。4.在TLR4+1196C/T等位基因上全都是C碱基,没有检测出T碱基。基因型全部为纯合子CC,不存在CT和TT基因型。[结论]原发免疫性血小板减少症患者和正常人的TLR4+896A和TLR4+1196C基因位点并未检测到突变型等位基因TLR4+896G和TLR4+1196T,可以认为TLR4+896A/G和TLR4+1196C/T的基因多态性与ITP的病理过程并不存在相关性。