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目的:功能良好的血管通路是保证透析质量和维持透析患者生命的基本前提。自体动静脉内瘘(Autogenous Arteriovenous Fistula,AVF)是多个指南和专家共识推荐的首选血管通路,但存在成熟不良、成熟后再狭窄等许多不足。内膜增殖是引起的AVF成熟不良及成熟后失功常见原因。增殖的内膜由大量血管平滑肌细胞(Vascular Smooth Muscle Cells,VSMCs)、成纤维细胞、肌成纤维细胞组成,并伴炎症细胞浸润、细胞外基质沉积。血小板衍生生长因子(Platelet Derived Growth Factor,PDGF)能够驱化细胞游走、刺激细胞增殖,还可介导VSMCs表型转变。自噬对维持细胞存活、保证细胞功能有重要意义,但异常的自噬可引起疾病的发生。本研究目的是通过检测AVF狭窄及邻近狭窄部位管壁自噬相关因子Beclin-1、LC3II以及PDGF-bb表达,进一步探讨细胞自噬对血管内膜增殖的意义,为今后临床防治内瘘狭窄提供理论依据。方法:收集河北医科大学第三医院2016年11月至2017年11月维持性血液透析患者行AVF成形术及重建术术中废弃静脉血管组织。留取行AVF重建术患者狭窄及邻近狭窄部分血管组织分别设为实验组A(n=10)及实验组B(n=10)。留取AVF成形术术中需结扎静脉组织设为对照组(n=10)。用苏木素-伊红染色(HE)方法观察血管组织形态学变化,免疫组织化学染色方法检测各组血管壁Beclin-1、LC3Ⅱ及PDGF-bb因子表达,并分析其表达情况及与内膜增殖的关系。所得实验数据采用SPSS 21.0统计软件进行分析,结果用均数±标准差((?)±s)表示,P<0.05认为差异有统计学意义。结果:分析组间年龄、性别,差异均无统计学意义(P>0.05)。1 HE染色光镜下观察实验组内膜与中膜均可见不同程度增厚,内膜增厚程度更显著。实验组A内膜增厚程度大,局部凸向管腔;实验组B内膜增殖程度相对较小,管腔相对均匀。对照组内膜中膜未见明显增殖。高倍镜下增殖的内膜中存在大量排列紊乱的血管平滑肌细胞。分别测量并计算内膜/中膜厚度比(2.39±0.21;0.97±0.12;0.16±0.022),结果进行两两对比,差异有统计学意义(P均<0.001)。2免疫组织化学染色2.1 Beclin-1免疫组化染色Beclin-1主要表达于内、中膜VSMCs胞浆中。实验组A内膜呈强阳性表达,中膜呈中等阳性表达(0.72±0.05);实验组B内、中膜均可见中等阳性表达(0.43±0.04)。对照组内膜和中膜弱阳性表达(0.19±0.02)。实验组A、实验组B分别与对照组比较,差异有统计学意义(P均<0.01)。进一步对比实验组A与实验组B,实验组A表达高于实验组B,差异有统计学意义(P<0.01)。2.2 LC3Ⅱ免疫组化染色LC3Ⅱ主要表达于内、中膜VSMCs胞浆中。实验组A内膜呈强阳性表达,中膜中等阳性表达(0.67±0.03);实验组B内、中膜均可见中等阳性表达(0.49±0.04)。对照组内膜和中膜LC3Ⅱ表达呈弱阳性(0.17±0.01)。实验组A、实验组B分别同对照组比较,差异有统计学意义(P均<0.01)。实验组A表达高于实验组B,差异具有统计学意义(P<0.01)。2.3 PDGF-bb免疫组化染色PDGF-bb主要表达于内、中膜VSMCs胞浆中。实验组A PDGF-bb表达内膜呈强阳性,中膜呈中等阳性(0.86±0.05);实验组B内膜和中膜均可见中等阳性表达(0.59±0.03)。对照组内膜和中膜表达呈弱阳性(0.24±0.02)。所得实验结果进行两两对比,差异具有统计学意义(P均<0.01)。2.4阴性对照组免疫组化染色内膜和中膜未见阳性染色。3相关性分析各组间PDGF-bb表达与Beclin-1存在正相关(r=0.883,P=0.001;r=0.919,P=0.000;r=0.947,P=0.000);各组Beclin-1表达与LC3Ⅱ呈正相关(r=0.859,P=0.001;r=0.896,P=0.000;r=0.997,P=0.000)。结论:1自噬参与了AVF建立后管壁重建、管腔狭窄过程,适度的自噬有助于内瘘成熟,但异常自噬可能介导内膜过度增殖。2 PDGF-bb可能通过诱导自噬参与血管平滑肌细胞表型转变,可能成为未来治疗及预防AVF狭窄的新靶点。