300余种植物精油的化学成分分析及抗AD活性研究

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阿尔兹海默症(AD)的发病机制复杂,临床多采用ACh E抑制剂作为AD治疗的药物,但这些药物存在选择性差,毒副作用大等问题。迄今为止,没有治疗AD的有效药物。精油为芳香植物中的主要活性组分,其中的化学成分具有分子量小、脂溶性强等特点,易穿过血脑屏障。有文献报道薰衣草精油等多种植物精油对神经系统疾病有显著疗效。但是,植物精油干扰AD没有系统深入的研究。本研究论文在构建植物精油库的基础上,通过GC-MS分析了346种植物精油的化学组成。同时,从分子水平及动物体内等多维度,对上述植物精油进行了神经系统疾病(老年痴呆)的功能性评价。基于上述化学和生物学研究的基础上,寻找植物精油的功能性分子标志物,为植物精油的合理开发利用提供研究基础。本论文第一章综述了阿尔兹海默症的发病机制和植物精油抗AD的活性研究进展。本论文第二章介绍了基源植物的产地等来源信息及植物精油的提取方法。本论文第三章介绍了346个精油对乙酰胆碱酯酶和丁酰胆碱酯酶抑制活性的筛选,发现在1 mg/ml浓度下共有255个精油具有胆碱酯酶(ACh E和BCh E)抑制活性。其中有237个精油对乙酰胆碱酯酶具有抑制活性,58个选择性较高(SI>10);有111个精油对丁酰胆碱酯酶具有抑制活性,8个选择性较高(SI>10)。其中胡椒精油的抗乙酰胆碱酯酶活性最好,选择性较高。本论文第四章介绍了斑马鱼体内AD模型的建立,使用Al Cl3造模,多奈哌齐为阳性药,通过斑马鱼行为轨迹分析仪监测斑马鱼的运动,分析斑马鱼的运动速度和对光-暗条件的反应判断药物活性。对346个精油进行筛选,筛选结果显示39个精油具有体内抗AD的活性。其中26个胡椒精油中有4个胡椒精油具有斑马鱼体内抗AD活性,这4个精油为来自不同产地的白胡椒精油。本论文第五章通过GC-MS对346个植物精油的化学成分进行鉴定和分析,并以胡椒精油为例进行化学成分分析及功能性分子标志物的研究。综上所述,本论文基于前期文献调研,开展方法学验证,建立了体外胆碱酯酶筛选模型及体内斑马鱼AD模型,对346个精油进行了抗乙酰胆碱酯酶活性筛选、抗丁酰胆碱酯酶活性筛选和体内抗AD活性筛选。研究结果表明,部分精油同时具有体内抗AD活性和体外抗胆碱酯酶活性,表明了精油的抗AD活性与胆碱酯酶相关。还有部分精油在斑马鱼体内具有抗AD活性,但不具有抗胆碱酯酶活性,这可能预示着AD复杂的作用机制,这些精油或许并不是通过抑制胆碱酯酶作用,它们的作用机制还需进一步探索。以胡椒精油为例,我们发现,白胡椒,特别是来自印度尼西亚的白胡椒是探索ACh E抑制剂用于AD治疗的重要资源,其中4-松油烯醇、γ-芹子烯和(-)-cis-Sabinol可作为质量标志物。此外,我们还应当考虑各活性化合物间的配伍及协同作用。
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