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据世界卫生组织统计,全球有超过三分之一的人口感染了结核分支杆菌(M. tuberculosis ,MTB),每年有200万人因结核病死亡。第4次全国结核病流调结果显示,我国有5.5亿人曾感染MTB,人群感染率为44.5%,现有活动性结核患者500万,每年新发132万结核病人。新发结核病例,大部分由于内源性复发,而不是外源性感染。因此,如何发现结核潜感染者,如何预测结核潜感染者的预后,并对那些活动性结核病危险性最大的潜感染者实施预防性抗痨治疗,是当今国际上结核病控制的重要战略和研究重点。研究不同状态结核病感染和卡介苗(Bacille Calmette-Guerin, BCG)接种对结核免疫应答的影响,涉及结核病免疫预防和治疗、结核疫苗研发、结核病血清学诊断、结核病流行病学监测和结核病临床治疗诸领域,不仅具有重要的学术研究价值,而且对于结核病流行病学调研及临床治疗亦具有重要的实际意义。结核菌能合成约4000种蛋白,其中多数蛋白具有免疫原性,加上多糖和脂多糖抗原,结核抗原种类、数量众多。本研究基于结核病临床治疗和实验室诊断现状,采用国内外已广泛应用于结核病血清学诊断的3种分支杆菌抗原,调查结核菌临床感染者(结核病患者)、结核菌亚临床感染者(潜感染者)和BCG接种者相应抗体应答水平及其变化特点。这3种结核分支杆菌抗原是:部分纯化蛋白衍生物(Purified protein derivation, PPD)、脂阿拉伯甘露聚糖(lipoarabinomannan, LAM)和38 kDa蛋白。新兵是一个身体素质高、年龄相对集中(18-19岁)、且以男性为主的群体。尽管入伍时经过严格体检,但新兵入伍半年后,仍有少数人被诊断为结核病。由于军队的生活和工作环境高度集中,任何散在的结核病例均有可能引发结核病暴发流行,对我军战斗力造成严重危害。如何有效发现和预防士兵结核病,是一个非常现实和紧迫的课题,其关键是如何发现新兵中的活动性结核病的潜感染者,并及早给予预防性抗痨治疗。目前检测结核潜感染的方法主要有结核菌素皮肤试验(tuberculin skin test, TST)和r-干扰素释放试验(IGRAS)。TST用于检测结核潜感染已有很长的历史,但其特异性差,特别是在结核病高发地区。IGRAS是近年来开发的检测结核潜感染新技术,用于检测结核潜感染不受卡介苗(BCG)接种的影响。但是,该方法不能区分活动性结核病与结核潜感染,检测结果(致敏T-细胞r-干扰素释放量)与潜感染者的预后无关,且受MTB感染时间制约。本研究根据新兵TST结果,对TST阴性新兵接种BCG后体液免疫的变化进行了监测;对TST强阳性新兵结核特异性抗体水平进行了调查;对TST强阳性和38 kDa蛋白抗体阳性的新兵进行了随访和信访,同时对各类结核病患者相应抗体应答水平及其变化进行了观察,并探讨结核病患者、高危结核潜感染者和BCG接种者的区别方法。本研究采用的3种结核分支杆菌抗原是:部分纯化蛋白衍生物(PPD)、脂阿拉伯甘露聚糖(LAM)和38 kDa蛋白。本研究首先对无卡痕、TST试验阴性新兵在接种BCG疫苗后对3种抗原的抗体应答进行了连续监测,发现:种卡新兵对抗原LAM和38 kDa蛋白不产生抗体应答;种卡后新兵血清PPD抗体水平持续升高,3个月达高峰,种卡后6个月PPD抗体滴度仍显著高于种卡前。结果表明,种卡1年内,PPD抗体血清学检测不适用于结核病的诊断,而采用抗LAM和抗38 kDa蛋白抗体检测通常不受种卡影响。10395名新兵TST试验结果表明,有卡痕和无卡痕新兵TST试验阳性率分别为70.2%和24.9%,差异非常显著(P<0.001);TST试验强阳性率的有卡痕(3.3%)和无卡痕新兵(2.5%)之间的差异亦有显著性(P<0.05),但TST试验不能区分结核潜感染者和BCG接种者。对TST强阳性新兵抗体应答特征进行调查和随访结果表明,TST强阳性新兵LAM抗体检测均为阴性,38 kDa蛋白抗体有6例阳性,其中5例为无卡痕新兵。3个月随访发现,6例TST强阳性且38 kDa蛋白抗体阳性新兵中,有3例具有结核体征,且均为无卡痕新兵。1年信访结果发现,无结核体征TST强阳性、38 kDa蛋白抗体阳性新兵健康状况良好,而3例有结核体征新兵中,1年内有2例诊断为结核性胸膜炎,另1例因工作调动失去联系。上述结果表明:TST强阳性且38 kDa蛋白抗体阳性可用作新兵结核菌潜感染的指标;本研究结果提示:对TST强阳性且38 kDa蛋白抗体阳性新兵给予预防性抗痨治疗,是降低士兵结核病发病率和减少部队结核病暴发流行最有效、最经济的防疫措施。结核菌潜感染新兵抗LAM抗体应答呈阴性;PPD抗体应答不能用于结核菌潜感染鉴别。对接受化疗的结核病患者的免疫应答调查表明:在化疗作用下,结核患者PPD抗体应答呈现3种模式。模式1患者占66.6%,多为菌阳病人,患者接受化疗后,PPD抗体水平持续增高,平均在化疗后1.8月抗体水平达到最高值,滴度升至化疗前的2～3倍,然后缓慢降低。模式2患者中复治病例比率高,接受化疗后血清PPD抗体从较高浓度逐渐降低。模式3患者多为病灶小、痰菌阴性、化疗前抗体水平低的初治结核患者,接受化疗后PPD抗体水平无变化。临床资料表明,化疗后抗体水平显著升高的患者疗效好。总之,本研究比较了临床活动性结核病人、结核菌潜感染者和BCG接种者的抗体应答特征,明确了新兵、儿童和新学员人群的结核病血清学诊断方法;明确了新兵结核潜感染的诊断方法;提出了士兵结核病预防措施;对结核病患者抗体应答特点及其与疗效的关系进行了初步探讨。