醛固酮瘤和正常肾上腺中长链非编码RNA表达谱差异的研究

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研究背景:原发性醛固酮增多症(简称原醛)是内分泌相关性高血压最常见的病因。目前发现原醛的亚型有很多种,其中产醛固酮瘤最为常见,约占原醛患者的60%。然而,其肾上腺皮质肿瘤的发生和醛固酮过度分泌的分子机制至今不明。长链非编码RNA (long non-coding RNA,lncRNA)是一类长度大于200bp,可转录但不具有蛋白编码功能的RNA成分。它们具有各种生物学功能,最近发现其异常表达可能与多种疾病的发生有关。研究目的:观察醛固酮瘤与正常肾上腺组织中lncRNA表达谱的差异并对差异表达的lncRNA进行初步的信息学分析,为进一步探讨其调控机制奠定基础。研究对象和方法:分别提取6例醛固酮瘤和6例正常肾上腺组织的RNA,分离纯化后反转录成cRNA,生成具有荧光标记的cRNA产物后,利用lncRNA芯片技术检测醛固酮瘤组和正常肾上腺组中lncRNA表达谱的差异。对原始数据进行处理、均一化后筛选出有差异表达的lncRNA,进行统计学和生物信息学分析。然后收集10例醛固酮瘤组织和9例正常肾上腺组织,从芯片筛选出的差异表达lncRNA中随机选取4条,用,real-time PCR技术对芯片结果进行验证。研究结果:lncRNA芯片一共检测出16160条lncRNA。将醛固酮瘤组与正常对照组进行比较:其中变化在1.5倍以上且差异具有统计学意义(p<0.05)的认为是表达有差异的lncRNA。与正常对照组相比,醛固酮瘤组中表达有差异的lncRNA一共检测到1809条,其中1181条表达上调,628条表达下调。Real-timePCR结果显示随机选取的四条lncRNA中,有两条lncRNA表达有明显差异,另外两条的表达差异无统计学意义。研究结论:本次研究首次通过芯片技术对醛固酮瘤中lncRNA表达谱的变化进行了检测。结果显示与正常对照组相比,醛固酮瘤存在lncRNA的表达改变。验证结果提示应用芯片结果仍需要对有表达改变的lncRNA在扩大的临床样本中进一步证实。这些差异表达的lncRNA可能为进一步阐明醛固酮瘤发病的分子机制提供了新的线索和思路。
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