【摘 要】
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第一部分：锌指蛋白ZNF463基因是我室新近克隆的精子发生相关基因。该基因是锌指蛋白基因ZNF331的一种剪接体。为了进～步研究KRAB锌指蛋白ZNF463基因表达的亚细胞定位，用RT-PCR法
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第一部分：锌指蛋白ZNF463基因是我室新近克隆的精子发生相关基因。该基因是锌指蛋白基因ZNF331的一种剪接体。为了进～步研究KRAB锌指蛋白ZNF463基因表达的亚细胞定位，用RT-PCR法从正常人睾丸组织中扩增得到人ZNF463基因的翻译区全长cDNA，并定向克隆到真核表达载体pEGFP-Cl质粒中，构建了ZNF463-GFP融合基因表达载体。然后以脂质体介导转入Cos-7细胞中，荧光显微镜观察显示：在转染重组真核表达载体pEGFP-ZNF463的Cos-7细胞中，荧光主要集中在细胞核内，而在转染空白载体pEGFP-Cl的细胞中，荧光布满整个细胞。本实验表明转染的Cos-7细胞能表达人ZNF463蛋白，该蛋白定位于细胞核内，与其所属家族成员作为转录因子发挥作用的特征相符。 第二部分：ZNF331基因是与甲状腺肿瘤发生密切相关的KRAB锌指蛋白基因。其异常表达可能是甲状腺肿瘤发生的分子机制之一。迄今尚未见有关该基因在转录水平调节的报道。为了从转录水平了解其调控机制，首先取其5′端启动子区域1.31kb片段及其8个不同长度的缺失体连接到含有萤火虫荧光素酶基因但无启动子的
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