生物体的发育、分化、代谢等整个生命过程中的基因表达都是在严格的调控下进行的。转录水平的调控是特定基因表达调控的中心环节，转录因子在转录调控中发挥关键作用，转录因子通过与调控元件及其它蛋白因子之间的相互作用完成复杂的转录调控过程。 近年来，作为一类重要的转录因子，锌指蛋白家族在真核基因表达调控中的作用受到了广泛关注。锌指结构域是首先发现于转录因子TFⅢA中的一种串联重复序列，可识别DNA序列。根据N端结构的不同，又可被分为不同的亚家族。其中，含有一个保守的KRAB基序的亚家族约占三分之一，该结构介导蛋白质的相互作用，引起转录抑制作用。 我们在一个多指家系相关基因的关键区域内(19 p13.1)鉴定了一个新的锌指蛋白基因ZNF333。生物信息学研究发现ZNF333与KRAB型锌指蛋白基因具有高度同源性，在C端存在锌指结构，是一个典型的Ab型KRAB锌指蛋白，也是目前已知的唯一具有两个KRAB结构的KRAB型锌指蛋白，并具有多个磷酸化位点。ZNF333存在两种剪接形式，长剪接子有两个KRAB结构域和一个10个锌指的基序，而短剪接子仅有一个KRAB结构域，无锌指基序。 为了了解ZNF333的功能，获取其所调控下游靶基因的线索，是很有必要的。通过PCR辅助的DNA特异位点选择法，我们发现ZNF333蛋白可结合并识别DNA序列，并且这种结合是锌离子依赖性的。通过凝胶阻滞试验进一步鉴定，我们得到了一个ATAAT的核心序列元件。系列突变试验和竞争性凝胶阻滞试验证明核心序列元件的保守性。 同时，为了研究ZNF333在转录调控中的作用，我们将ATAAT的核心序列克隆于报告基因载体的上游启动子区域，研究其对转录的影响。结果充分揭示了ZNF333通过ATAAT元件发挥转录调节作用，其KRAB结构域不仅具有转录抑制活性，而且是一个序列特异性的锌指蛋白，并根据核心序列分析了可能的下游靶基因。同时，细胞转染实验及结构分析也强烈暗示在转录调控中可能存在翻译