【摘 要】
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目的:（1）筛选姜三七镇痛抗炎药效的活性部位。（2）HPLC法建立姜三七活性部位的指纹图谱。（3）研究姜三七活性部位HPLC指纹图谱与其镇痛抗炎作用的谱效关系。（4）研究姜三七体外抗氧化的活性,筛选出体外抗氧化的药效活性部位,并对其活性部位抗氧化的血清药理学进行初步研究。（5）HPLC法同时测定不同产地姜三七乙酸乙酯部位中的3个成分（原儿茶酸、对羟基苯甲酸、对羟基苯甲醛）的含量。方法:（1）通过采
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目的:（1）筛选姜三七镇痛抗炎药效的活性部位。（2）HPLC法建立姜三七活性部位的指纹图谱。（3）研究姜三七活性部位HPLC指纹图谱与其镇痛抗炎作用的谱效关系。（4）研究姜三七体外抗氧化的活性,筛选出体外抗氧化的药效活性部位,并对其活性部位抗氧化的血清药理学进行初步研究。（5）HPLC法同时测定不同产地姜三七乙酸乙酯部位中的3个成分（原儿茶酸、对羟基苯甲酸、对羟基苯甲醛）的含量。方法:（1）通过采用二甲苯致小鼠耳廓肿胀的影响以及角叉菜胶致小鼠足跖肿胀的影响的方法来研究姜三七的抗炎作用;采用对小鼠热板致痛的影响以及对醋酸致小鼠扭体反应的影响的方法来研究姜三七的镇痛作用。（2）运用HPLC法建立姜三七活性部位的指纹图谱。（3）通过Pearson相关系数法和灰色关联度法研究活性部位与其镇痛抗炎作用的谱效关系。（4）采用DPPH法测定姜三七不同极性部位的体外抗氧化活性;运用FRAP法测定姜三七不同极性部位总抗氧化能力;采用Fenton-邻二氮菲法和邻苯三酚自氧化法对姜三七抗氧化活性部位的血清药理学进行初步研究。（5）运用HPLC法同时测定姜三七乙酸乙酯部位中的原儿茶酸、对羟基苯甲酸、对羟基苯甲醛的含量。结果:（1）不同部位提取物的镇痛抗炎的研究:姜三七80%乙醇总提取物高剂量和乙酸乙酯提取物高、中剂量对小鼠具有极显著的抗炎作用（P＜0.01）,且乙酸乙酯提取物的抗炎效果优于80%乙醇总提取物。而姜三七80%乙醇总提取物中剂量组、石油醚提取物高剂量组、乙酸乙酯提取物低剂量组有显著的抗炎作用（P＜0.05）。姜三七乙酸乙酯提取物高剂量组对小鼠具有极显著的镇痛作用（P＜0.01）,而80%乙醇总提取物高、中剂量组、石油醚提取物高剂量组对小鼠具有显著的镇痛作用（P＜0.05）,且乙酸乙酯提取物的镇痛效果优于80%乙醇总提取物和石油醚提取物。（2）HPLC法建立了姜三七80%乙醇总提取物部位、石油醚部位、乙酸乙酯部位的指纹图谱,80%乙醇总提取物部位和石油醚部位以莪术二酮作为参照峰、乙酸乙酯部位以对羟基苯甲酸作为参照峰,80%乙醇总提取物部位、石油醚部位和乙酸乙酯部位分别标定了16、15、18个共有特征峰,10批不同产地药材样品与对照指纹图谱相似度均在0.9以上,分别聚为3、2、3类,提取了三个主成分因子,聚类分析与主成分分析结果相一致。（3）基于Pearson相关分析得到姜三七乙酸乙酯部位与镇痛抗炎作用具有显著相关性的是10、18号峰（P＜0.01）;基于灰色关联度分析表明1（原儿茶酸）、17、14、9、16、2（对羟基苯甲酸）、4（对羟基苯甲醛）号峰对其镇痛作用贡献较大;14、1（原儿茶酸）、17、9、4（对羟基苯甲醛）、2（对羟基苯甲酸）、16、7、6号峰对其抗炎作用贡献较大（关联度均＞0.7）。（4）结果表明姜三七各极性部位对DPPH自由基均有一定的抗氧化作用,且乙酸乙酯部位抗氧化能力最强,与空白组比较,乙酸乙酯提取物及含药血清对O2-·和·OH两种自由基有一定的清除能力（P＜0.05）。（5）HPLC法同时测定原儿茶酸、对羟基苯甲酸、对羟基苯甲醛含量的方法,结果表明原儿茶酸、对羟基苯甲酸、对羟基苯甲醛分别在0.00236～0.01652mg/m L（r=0.99991）、0.00212～0.01484mg/m L（r=0.99997）、0.00149～0.01043mg/m L（r=0.99998）范围内线性关系良好,方法学考察的内容均符合相关要求。结论:（1）姜三七乙酸乙酯提取物对小鼠的镇痛抗炎均有较好的抑制作用。（2）10个产地姜三七的指纹图谱与对照指纹图谱都具有较好的相似性,各产地间的化学成分种类和含量有一定的差异。（3）姜三七的镇痛抗炎作用是多种成分共同作用的结果。三种主要活性成分是:原儿茶酸、对羟基苯甲酸、对羟基苯甲醛。（4）姜三七乙酸乙酯提取物对O2-·和·OH两种自由基具有一定的清除能力。（5）姜三七的含量测定方法和指纹图谱方法操作简便,重复性好,稳定性高,可用于姜三七的质量控制。
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