石油是推动工业发展和人类社会进步的重要能源物质，石油及其化工制品在人类的生产生活中应用范围日益广泛，但是随之而来的石化制品的泄漏与排放对环境的破坏日益严重，尤其是石油烃类对水体和土壤的污染，引起社会的广泛关注。柴油作为柴油机车、拖拉机、船舶、发电等各种高速柴油机器设备的燃料，主要成分是一系列由碳氢元素组成的C8-C30的链烃类水不溶性物质，密度比水轻，一旦发生泄漏，难以被彻底清除。在各种治理方法中，生物修复技术因其治理成本低，生物降解效率高，并且不会引入二次污染等优点被认为是最具潜力和最有应用前景的石油烃类污染修复手段。本课题研究了柴油的生物修复技术，筛选具有柴油降解能力的菌株并研究其生物降解的机制，主要有以下几个方面：1选择以柴油作为微生物生长的唯一碳源，从自然界被石油烃类污染过的土壤中经过富集、分离、驯化，筛选出9株具有柴油降解能力的菌株。选取其中生长速率较快，柴油生物降解率较高（分别为34%和30%）的两株菌A和C继续研究。2通过形态观察、生理生化试验和16S rDNA序列分析，对菌株A和菌株C进行了初步鉴定，分别将其鉴定并命名为短小芽孢杆菌A（Bacillus pumilus A）和枯草芽孢杆菌C（Bacillus subtilis C）。3单因素试验考察不同的环境因素水平下两株菌对柴油的生物降解率的影响，结果表明，在柴油含量为10mL/L的柴油降解培养基中，B. pumilusA和B. subtilis C的适宜培养条件分别为：37℃、pH8.0、接种量15%和37℃、pH7.5、接种量10%。在此条件下，两株菌第7d降解率分别达到42%和40%。根据单因素试验结果，设计正交试验，确定两株菌降解柴油的最适环境条件与单因素试验结果一致。4在实验室条件下，模拟土壤环境，考察了两株菌在土壤中对柴油的生物降解情况。在5g土壤中加入1mL的柴油，恒温37℃，维持40%-50%的湿度，连续降解5周，发现两株菌第1周降解率均超过了50%，到第5周时，降解率达到70%以上。5考察了柴油生物降解过程中的降解特性，发现B. subtilis C比B. pumilus A的亲油性高，且两株菌在对柴油进行降解的过程中都产生表面活性剂。提取其表面活性剂并进行红外定性表征，显示二者均为脂肽类分子。采用GC/MS对柴油生物降解过程进行分析，发现柴油的各个组分均有不同程度的降解。