【摘 要】
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目的:CD4+T细胞作为T细胞中的一个重要群体因分泌的细胞因子不同而被分为多个亚群,各个Th细胞亚群在自身免疫疾病发病中的作用在近十年中得到了广泛的研究及肯定。脂肪干细胞（adiposederived stem cells,ADSCs）是一种多能间充质细胞,它具有分化为脂肪细胞、成骨细胞及软骨细胞的能力。近期越来越多的研究表明,自体或同种异体来源ADSCs具有对适应性和先天性免疫发挥调节作用的独特
【基金项目】
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国家自然科学基金（NO.51872332）；
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目的:CD4+T细胞作为T细胞中的一个重要群体因分泌的细胞因子不同而被分为多个亚群,各个Th细胞亚群在自身免疫疾病发病中的作用在近十年中得到了广泛的研究及肯定。脂肪干细胞（adiposederived stem cells,ADSCs）是一种多能间充质细胞,它具有分化为脂肪细胞、成骨细胞及软骨细胞的能力。近期越来越多的研究表明,自体或同种异体来源ADSCs具有对适应性和先天性免疫发挥调节作用的独特能力。CD4+T细胞按分泌因子的不同可分为Th0、Th1、Th2、Tfh、Th3及Th17。目前对自身免疫疾病的研究表明,Th1/Th2细胞免疫反应失衡导致了疾病的发生与发展,而其中Th1细胞是介导自身免疫疾病发生发展的关键因素。目前的研究发现,ADSCs可以对由免疫反应引起的Th1/Th2失衡及调节性T细胞的功能进行调节,从而抑制或逆转炎症进程。选择ADSCs重新调整患者细胞免疫Th1/Th2平衡并寻找特定效应T细胞将成为一项具有创新性的设计策略。植物血凝素（Phytohemagglutin in,PHA）是一种低聚糖与蛋白质的复合物,可刺激T细胞增殖分化。本实验拟模拟自身免疫疾病炎症微环境中,探究ADSCs对CD4+T细胞分泌炎症因子能力的影响,进而推断ADSCs对于自身免疫疾病细胞免疫的调控作用机制。方法:1、提取人ADSCs及外周血单个核细胞（Peripheral blood mononuclear cell,PBMC）,对ADSCs进行体外培养及鉴定;2、免疫磁珠法分离CD4+T细胞;3、比较CD4+T细胞经过PHA刺激后分泌细胞因子的变化;4、比较IFN-γ/TNF-α预处理的ADSCs与PHA激活的CD4+T细胞进行共培养后IFN-γ、TNF-α、IL-10及IL-4浓度水平变化5、使用SPSS19.0和Graph pyramid 5软件分析数据。P<0.05被认为具有统计学意义。结果:1、成功提取ADSCs、PBMC,并分离CD4+T细胞;2、与对照组相比,经PHA刺激的CD4+T细胞分泌较高水平IFN-γ、TNF-α、IL-4和IL-10（P<0.05）;3、与对照组相比,ADSCs经IFN-γ/TNF-α预处理后与PHA激活的CD4+T细胞共培养,可抑制其分泌IFN-γ及TNF-α,并促进其分泌IL-10（P<0.05）,对分泌IL-4的影响无显著差异（P>0.05）。结论:PHA可以激活CD4+T细胞,促进其分泌IFN-γ、TNF-α、IL-4和IL-10;炎性环境下ADSCs能够发挥免疫抑制作用,抑制CD4+T细胞分泌炎性因子IFN-γ和TNF-α的,并促进炎症抑制因子IL-10的分泌。证实ADSCs对免疫反应具有抑制作用。
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