水蛭汤促进皮瓣愈合机理的研究

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目的:研究中药水蛭汤促进新生血管形成、提高皮瓣成活率机理。 方法:选用100只Wister大鼠,随机分为5组,每组20只动物,背部做7.5×3cm~2大小随意皮瓣的动物模型。术后各组应用生理盐水、小剂量肝素、单味水蛭、VEGF、水蛭汤进行治疗。采用常规病理组织学、组织形态计量方法,逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)方法及免疫组织化学方法(ABC法)对皮瓣愈合不同阶段(术后4、14天)皮瓣成活率、(术前、术后1、4、7、14、21天)血管内皮细胞生长因子(VEGF)mRNA、VEGF表达情况进行检测,研究水蛭汤对皮瓣愈合的影响,探讨其机理。 结果:①病理观察:各组术后早期均见皮瓣肿胀,随时间延长,单味水蛭组、VEGF组、水蛭汤组皮瓣肿胀程度降低,皮瓣坏死少。②各组皮瓣成活率:术后4天各组无显著差异(P>0.05)。术后7天单味水蛭组、VEGF组、水蛭汤组明显高于其他两组,有显著性差异(p<0.05)。③RT-PCR方法检测VEGFmRNA的结果:术后1天,5组VEGFmRNA的表达无明显差异,但均高于术前;术后4-7天,单味水蛭组、水蛭汤组VEGFmRNA的表达明显强于其它3组,术后14天,这两组仍能检测到相当量的VEGF表达;而其它3组此时已检测不到VEGFmRNA的表达。④免疫组化检测VEGF:VEGF在对照组和治疗组中的表达 中文摘要均呈阳性,但程度不一。皮瓣组织在术后第1天,其VEGF的表达强于术前组,且以VEGF组最高;术后4天,生理盐水组、肝素组VEGF阳性细胞量与术前组相比,无明显差异,单味水蛙组、VEGF组、水蛙汤组则差异显著,且呈上升趋势,术后7天,单味水蛙、水蛙汤组阳性细胞量明显多于其余 3组,术后 14天,VEGF阳性细胞的逐渐下降,但仍多于正常,至第川天,接近正常。 结论:本实验采用Wister大鼠背部皮肤(带肉膜)组织做超比例随意皮瓣模型,操作简单、重夏性好,是比较理想的动物皮瓣模型。应用单味水蛙、VEGF蛋自、水蛙汤治疗可明显促进微血管的生成,改善皮瓣的血供状态,提高皮瓣的成活率。水涯汤属于祖国传统中药制剂,无毒副作用,我们推测其治疗外科皮瓣愈合的机理是:①水蛙汤制剂能诱导机体VEGFmRNA的表达,使组织VEGF蛋白含量增加,促进皮瓣吻合区微血管再生;②水蛙汤中水蛙素具有消除肿胀、抑制血栓形成,为微血管形成侧枝循环赢得时间;③水蛙汤具有清热解毒、益气生肌、镇痛抗炎的作用。因此,水蛙汤是外科皮瓣术后用药的理想选择。
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