作为转录水平上一种重要的调控元件，启动子控制着基因在特定组织、特定发育阶段以及一定环境条件下表达。目前，基因功能及调控外源基因在转基因植物中精确表达等方面的研究成为当前植物基因工程研究的重点，而这些工作的开展主要依靠一个合适的启动子来实现。目前，国内外在植物基因工程中最常用的启动子是组成型启动子和不同细胞或器官的特异性启动子。组成型启动子使目的基因恒定而持续表达，过度消耗细胞内的物质和能量，影响正常代谢；器官特异性启动子虽然可以控制表达的部位，但不能有效控制基因表达的时间和强度。诱导型启动子则有希望解决这两个方面的问题。利用诱导型启动子与报告基因融合，研究基因表达规律，进一步对外源基因实现定时、定点、定量的三维调控表达，具有重要的理论意义和实际应用价值。 研究表明，水稻幼苗在250μmol·L<-1>-10 mmol·L<-1>的硝酸盐溶液中培养时即可诱导包括硝酸还原酶在内的大量蛋白质的表达，在无硝酸盐的环境中时这种诱导作用又逐渐消失。本文对比分析了水稻(Oryza Sativa)幼苗中受硝酸盐诱导的基因，选择了受硝酸盐诱导表现较强的6个特异性的基因，克隆出各自基因对应的5′侧翼序列，并初步鉴定各序列在硝酸盐诱导下的启动子功能。为进一步研究其调控机理，为探讨基于硝酸盐诱导建立理想的“基因开关”的可行性奠定了基础。主要研究成果如下： 本研究从水稻幼苗(两优287)中克隆出了6个可能受硝酸盐特异诱导的基因的部分cDNA片段。通过半定量PCR鉴定分析，获得了3个受硝酸盐特异诱导的cDNA片段，分别为cNR、cNiR和cGS。进一步定位了上述3个cDNA所对应的基因。在此基础上，利用生物信息学分析水稻基因组数据库并通过silicon cloning得到了上述3个基因的5′调控区域。利用PCR进行克隆并测序，序列分析表明3个序列长度分别为1187bp，1296bp，1643bp。序列经启动子PLACE软件扫描分析，结果表明：3组序列中ATG上游、下游邻近区域均存在多种启动子的保守元件，如TA-box，CpG岛，CAAT-box等。 进而，将经限制性酶切的上述3个启动子序列分别克隆到表达载体pCAMBIAl391Z中报告基因 gus 的上游，构建了新的植物表达载体 pCAMBIA-pro-NiR、pCAMBIA-pro-NR 和 pCAMBIA-pro-GS。所有载体经酶切验证后转化至根癌农杆菌EHA105中。通过农杆菌介导法转化水稻愈伤组织中，通过瞬时表达检测了 GUS 的表达情况，结果表明，转化 pCAMBIA-pro-GS 的愈伤组织在硝酸盐诱导下驱动了报告基因的表达，无硝酸盐诱导时报告基因不表达。