人工合成生物活性抑制剂具有多种副作用,因此急需安全、高效和无副作用的活性抑制剂,桦褐孔菌固体发酵鸭跖草产物具有极高药用价值且含有丰富的活性物质,可作为天然生物活性抑制剂的新来源。本实验利用生物活性极强的桦褐孔菌固体发酵鸭跖草,发酵产物活性物质和生物活性得到显著增加,研究发酵产物的抑菌机理,利用液质联用技术分析发酵过程对鸭跖草成分的影响,以此探究发酵产物生物活性变化的原因。主要研究结果如下:1.利用桦褐孔菌对9种中药培养基进行发酵筛选,并优化发酵条件。结果显示,桦褐孔菌对鸭跖草、蒲公英和鱼腥草培养基发酵情况最好,优化了发酵条件如最适温度25℃、粉碎粒度过18目筛、含水量为60%等,确定发酵终点为40 d。实验表明,桦褐孔菌固体发酵中药培养基效果显著。2.利用Folin-Ciocalteu和AlCl₃法测定发酵前后鸭跖草的活性物质含量,测量对DPPH自由基、α-葡萄糖苷酶、黄嘌呤氧化酶、乙酰胆碱酯酶和酪氨酸酶等生物活性的抑制率。结果显示,发酵鸭跖草酚类和黄酮物质增加了119.96%和170.13%,5种生物活性抑制率分别提升了162.15%,204.21%,717.83%,776.42%,312.08%,而发酵蒲公英和鱼腥草的活性物质和生物活性几乎不变。实验表明,桦褐孔菌发酵鸭跖草产物生物活性获得大幅提高,且相关性分析表明发酵中药的活性物质与生物活性的提高有显著关系。3.采用微量法测定发酵前后鸭跖草对铜绿假单胞菌的最小抑菌浓度,以及对生物膜形成和毒力因子合成的抑制影响。结果显示,发酵和未发酵鸭跖草的最小抑菌浓度分别为16 g/L和64 g/L,发酵产物抑制了生物膜的形成,降低了毒力因子的生成。实验表明,桦褐孔菌发酵增强了鸭跖草调控铜绿假单胞菌群体感应作用,通过控制群体感应系统发挥抑菌作用。4.采用HPLC分析桦褐孔菌发酵前后鸭跖草的主要化学组分,利用UHPLC-QTOF/MS技术进行发酵前后鸭跖草代谢物检测。结果显示,HPLC分析表明桦褐孔菌发酵鸭跖草过程增加化学物质的含量和产生了新的代谢物;UHPLC-QTOF/MS鉴定了914种代谢物和55种黄酮代谢物,发酵产物中8种黄酮物质含量显著增加且具有极强生物活性,包括4种新产生的代谢物。实验表明,发酵鸭跖草过程提高活性物质的含量和种类,进而增强鸭跖草的生物活性,为进一步开发桦褐孔菌固体发酵鸭跖草资源提供理论依据。