【摘 要】
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目的:1型糖尿病（T1D）是一种胰岛β细胞被破坏的自身免疫性疾病,涉及Th1、Th17、Treg等亚群。已证明齿龈间充质干细胞（GMSC）对T1D有改善作用,但尚未见到GMSC源性外泌体（GMSC-EXO）治疗T1D的相关报道,故本研究预探究GMSC-EXO是否能改善T1D的严重程度及其潜在的治疗机制。方法:本研究分为体内实验和体外实验。体内实验:使用NOD/Lt J小鼠作为体内实验的对象,设置P
【基金项目】
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国家重点研发计划项目（No.2017YFA0105802）； 国家自然科学基金项目（No.31600793）； 辽宁省自然科学基金面上项目（No.2021-MS-165）；
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目的:1型糖尿病（T1D）是一种胰岛β细胞被破坏的自身免疫性疾病,涉及Th1、Th17、Treg等亚群。已证明齿龈间充质干细胞（GMSC）对T1D有改善作用,但尚未见到GMSC源性外泌体（GMSC-EXO）治疗T1D的相关报道,故本研究预探究GMSC-EXO是否能改善T1D的严重程度及其潜在的治疗机制。方法:本研究分为体内实验和体外实验。体内实验:使用NOD/Lt J小鼠作为体内实验的对象,设置PBS组、GMSC-GW4869组、GMSC组、GMSC-EXO组、GMSCmi R-23a I组、GMSCINC组、GMSCmi R-23a I-EXO组及GMSCINC-EXO组,于小鼠8周龄时尾静脉注射相应的干细胞或外泌体,每周测量一次血糖和体重;小鼠28周龄时取材,Western blot检测胰腺IL-6R、JAK1及STAT3蛋白表达,探究GMSC-EXO能否通过其中的mi R-23a-3p抑制IL-6R/JAK1/STAT3信号通路发挥免疫抑制作用;HE染色观察胰岛炎症程度;流式细胞术检测脾细胞中CD4+T细胞亚群比例变化;ELISA检测血清中IFN-γ、IL-17A及IL-10水平的变化。体外实验:体外分为5组,设置PBS组、GMSC组、GMSC-EXO组、GMSCmi R-23a I-EXO组及GMSCINC-EXO组,将CD4+T细胞分别与这几组共培养3天,流式细胞术检测CD4+T细胞亚群比例变化;ELISA检测培养上清中IFN-γ、IL-17A及IL-10水平的变化。结果:体内实验数据显示,与PBS组比较,各治疗组对NOD小鼠均有明显的改善作用,胰腺蛋白中IL-6R、JAK1及STAT3均下调,HE染色观察到胰岛炎症细胞浸润情况明显改善,脾中促炎性细胞（Th1、Th17）比例降低,而抑炎性细胞（Treg）比例升高;血清中促炎因子（IFN-γ、IL-17A）水平下降,抑炎因子（IL-10）水平升高。体外实验数据显示,共培养后,与CD4+T细胞组比,各治疗组促炎性细胞（Th1、Th17）比例降低,抑炎性细胞（Treg）比例升高;促炎因子（IFN-γ、IL-17A）水平下降,抑炎因子（IL-10）升高。结论:1.GMSC-EXO与GMSC均能有效改善T1D,且GMSC-EXO效果优于GMSC;2.mi R-23a-3p是GMSC-EXO发挥抑炎作用的内容物之一;3.mi R-23a-3p可通过IL-6R/JAK1/STAT3通路缓解炎症,改善T1D。
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