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口蹄疫(Foot-and-Mouth Disease, FMD)是由口蹄疫病毒(Foot-and-Mouth Disease Virus, FMDV)引起的一种急性、热性、高度接触传染性和可快速远距离传播的动物疫病。猪、牛、羊等主要的家畜均可感染此病,并能形成大规模流行,造成巨大的经济损失和政治影响。FMD病原是FMDV,属小RNA病毒科(Picornaviridae)口蹄疫病毒属(Aphthavirus),FMDV易发生变异。迄今为止,国际上防控FMD的主要策略仍然是免疫接种。影响FMD灭活疫苗免疫效力的因素很多,但就疫苗本身而言,最关键的莫过于筛选出性能优良的制苗毒株。为了应对FMD新变异株的出现和国外疫情的传入,提高免疫预防的可靠性、针对性,有必要适时筛选新的后备制苗毒株,为研究新的FMD灭活疫苗提供基础材料。本研究通过对收集的5株FMD O型“泛亚”谱系流行代表毒株进行病原学、流行病学和免疫学系统研究和分析,初步筛选出新的后备制苗毒株。主要研究内容和结果如下:1.收集了1999~2006年间我国不同地域流行毒株中有代表性的5株O型FMD毒株,经反向间接血凝试验和对VP1基因克隆测序确定了5株毒为O型FMD“泛亚”谱系,5株毒株分别为:O/GSLT/06、O/NXZN/04、O/JXYJ/05、O/HNXH/00和O/NX/99。2. 5株毒经生物学特性研究表明:(1)各毒株对乳鼠的适应性良好、致病力较强,在连传4代以内致乳鼠发病死亡的时间缩短到27h以内,O/GSLT/06、O/NXZN/04、O/JXYJ/05、O/HNXH/00和O/NX/99乳鼠毒价(LD50)分别为10-7.5、10-8.00、10-7.33、10-7.5、10-7.00;(2)各毒株对制苗材料BHK-21细胞的适应性较好、致细胞病变效应较强,经BHK-21细胞连续传代后,各毒株致细胞病变时间稳定在11~13h,细胞毒价(TCID50)分别为10-6.33、10-5.38、10-5.08、10-6.08和10-6.33。相对而言,O/GSLT/06毒株更具有优势,细胞适应性较好,病变时间稳定在11h,有望能作为新的制苗毒种。3.通过对VP1基因克隆测序,分析了5株毒的VP1基因,绘制了VP1基因系统发生树。5个毒株彼此间的核苷酸序列同源性为92.8%~97.0%,属于同一基因亚型,“泛亚”谱系;5个毒株的VP1氨基酸序列在不同位点均发生了变异,而且在抗原位点也都有所变异。4.对各毒株的免疫学特性比较研究。表明,各毒株均具有较好的免疫原性,但以O/GSLT/06株最好,且与其它分离毒株抗原关系密切(r值大于0.4),可作为制造FMD灭活疫苗的后备制苗毒株。