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研究背景和目的： 胃癌的侵润和转移是胃癌致死和复发率居高不下的关键因素，近期研究发现，胃癌中肿瘤起始细胞标志物 CD133的表达与胃癌的侵润转移相关，在血液中检测CD133的表达可预测肿瘤复发。SDF-1α/CXCR4轴对多种肿瘤有调控作用，其对胃癌也有上调多种基因的表达。 我们前期研究表明，胃癌标本中，CXCR4和CD133表达有相关性，且两者都与与肿瘤的侵润深度和淋巴结转移率呈正相关。提示 SDF-1α/CXCR4轴对胃癌中CD133表达有调控作用，但是具体分子生物学机制未有报道，本课题将在前期实验的基础上，进一步筛选和探讨SDF-1α/CXCR4轴下游和CD133上游间的信号通路，以期阐明SDF-1α/CXCR4轴对胃癌CD133表达分子信号机制。 研究方法： 正常条件下培养人胃癌 KATO-Ⅲ细胞，免疫细胞化学染色检测胃癌 KATO-III细胞系中CXCR4、Akt、p-Akt及CD133的表达。 应用含 SDF-1α培养液，作用于细胞，采用半定量反转录聚合酶链反应（RT-PCR）、蛋白免疫印迹法（Western blot）检测KATO-Ⅲ中CD133mRNA和蛋白的表达。 筛选出合适浓度的CXCR4特异性抑制剂AMD3100预处理KATO-Ⅲ细胞，然后再用SDF-1α刺激已预处理的细胞，收集细胞，采用RT-PCR和Western blot法检测CXCR4、CD133的表达。了解SDF-1α/CXCR4轴对CD133表达的影响。 筛选出合适浓度的PI3K特异性抑制剂 LY294002预处理 KATO-Ⅲ细胞，然后再用SDF-1α刺激已预处理的细胞，收集细胞，采用RT-PCR和Western blot法检测CXCR4、Akt、p-Akt、CD133的表达。探索SDF-1α/CXCR4轴对CD133的调控是否是通过Akt信号通路来实现的。 研究结果： 1.免疫细胞化学染色证实胃癌KATO-Ⅲ细胞呈CXCR4、Akt、p-Akt及CD133阳性表达。 2. SDF-1α激活CXCR4下游PI3K/Akt信号通路，SDF-1α可诱导Akt磷酸化，即p-Akt增高。但总Akt表达未见明显改变，同时使得CD133表达增高，但CXCR4无明显变化。 3. CXCR4特异性抑制剂AMD3100可有效地降低p-Akt水平，表明p-Akt水平上升SDF-1α/CXCR4轴激活引起的，同时使得CD133表达下降，据此可推测CD133的表达也是通过这条信号通路来实现调节的。 4.以PI3K特异性抑制剂LY294002处理KATO-Ⅲ细胞后，结果发现，LY294002处理能显著抑制SDF-1α引起的Akt活化，即p-Akt明显被抑制。同时CD133的表达也降低。据此推测CD133的表达很有可能是通过SDF-1α/CXCR4-PI3K/Akt-CD133这条信号通路来实现调节的。 研究结论： 1.胃癌KATO-III细胞中CXCR4、Akt、p-Akt及CD133免疫细胞化学呈阳性表达。 2. SDF-1α/CXCR4轴能够显著诱导胃癌中CD133表达。 3. SDF-1α/CXCR4轴可经过Akt信号通路调控CD133的表达。