【摘 要】
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‘凤丹’(Paeonia ostii)是近年来颇受关注的木本油料植物,具有极高的观赏价值和经济价值,但生产中普遍存在种子产量不高的情况,因此研究‘凤丹’种子油脂积累过程中生理生化指标的变化对其产业化发展具有十分重要的作用。本论文主要利用核磁成像技术(MRI)获得各发育阶段‘凤丹’种子的质子密度分布,使用体视显微镜和透射电镜(TEM)分别观察种子内部形态发育和油体变化,同时还观察和测定了各发育阶段种
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‘凤丹’(Paeonia ostii)是近年来颇受关注的木本油料植物,具有极高的观赏价值和经济价值,但生产中普遍存在种子产量不高的情况,因此研究‘凤丹’种子油脂积累过程中生理生化指标的变化对其产业化发展具有十分重要的作用。本论文主要利用核磁成像技术(MRI)获得各发育阶段‘凤丹’种子的质子密度分布,使用体视显微镜和透射电镜(TEM)分别观察种子内部形态发育和油体变化,同时还观察和测定了各发育阶段种子和蓇葖果颜色和横、纵径的变化,种子鲜、干重等生物学指标,测定了含油率和含水率的变化,并通过气相色谱-质谱联用分析法(GC-MS)技术测定‘凤丹’种子发育过程中油酸、亚油酸和α-亚麻酸含量的动态变化。为进一步了解油脂积累规律以及其与营养物质之间的代谢、转化规律,还研究了‘凤丹’种子各发育阶段中可溶性糖、粗淀粉、可溶性蛋白含量的变化以及其相关酶活性和油脂合成相关酶活性的变化。主要结果为:(1)随着蓇葖果不断成熟,果荚颜色从绿色转变为黄褐色,最后呈现灰褐色,然后成熟开裂;种子成熟过程中,种子颜色会由黄色变为乳白色,成熟时呈现黑褐色,种皮也比较坚硬。(2)花后45-95 d时,蓇葖果膨大期与种子形态发育时期基本同步,横、纵径增长速度较快;花后95 d后,横、纵径出现下降趋势并逐渐趋于平稳。(3)体视显微镜观察发现,‘凤丹’种子发育初期(花后45 d)时,种子内主要是种皮、珠被组织和胚乳组织等结构;花后45-85 d时,随着种子不断发育,珠被组织不断退化,为胚乳组织形成提供营养,胚乳面积不断增大,此时也是种子体积增大的重要时期,应及时提供水分补给;花后85 d后,珠被已经完全退化,胚乳达到最大面积,并逐渐硬质化直至种子完全成熟,此阶段应注意为‘凤丹’植株提供生长所需的肥料。(4)MRI图像观察发现,‘凤丹’种子的发育可分为两个发育阶段:形态构建阶段(花后45-85 d)和营养积累阶段(花后95-115 d)。且在花后45-85 d时,同一个蓇葖果各果荚的发育存在不均衡性,且同一果荚中各种子的发育速率也不相同;直至花后95 d时,同一果荚内的种子发育速率才基本达到一致。(5)TEM观察发现,与胚乳中的油体相比,胚中油体的形成稍快且形成时期较早。随着种子的不断发育,胚和胚乳中的液泡面积不断变小,数量也不断减少直至消失,高电子致密物质不断增多并逐渐聚集,形成较大的团状结构,与此同时,油体的数量和大小持续增长,且从细胞壁周围向细胞中央扩散,大小交错排列在高电子致密物质周围。(6)‘凤丹’种子油脂合成旺盛期主要集中在花后45-85 d,种子发育过程中含油率不断增加,直至最后完全成熟时达到41.6%;而含水率在发育过程中则呈现不断下降趋势,与含油率呈极显著负相关关系。(7)‘凤丹’种子中的ACCase酶活性和PPase酶活性在花后45-85 d时快速上升,与油脂合成旺盛期基本吻合。随着油脂积累速度的下降,ACCase酶活性和PPase酶活性也相应出现减弱的趋势。(8)‘凤丹’种子各发育阶段中,可溶性糖含量和淀粉含量的变化呈显著正相关关系,在种子快速膨大期(花后45-85 d)时,两者为种子生长发育提供营养,均呈显著下降趋势,并于花后85 d时达到了本次测定的最低值,分别为33.0 mg/g FW和11.7 mg/g FW;而可溶性蛋白在花后45-85 d时快速积累,与糖类物质的消耗趋势相对应,于花后85 d时达到本次测定最高值53.6 mg/g FW;花后85-95d时略微下降后逐渐趋于稳定。此外,总淀粉酶活性和总蛋白酶活性变化也分别与粗淀粉和可溶性蛋白代谢变化进程相一致。(9)‘凤丹’种子中的三种主要不饱和脂肪酸表现出“慢-快-慢”的积累模式,并且全部在花后65-105 d期间迅速积累,这说明这个阶段是培育高α-亚麻酸含量的关键时期,应该注意加强管理。(10)在种子成熟的最后阶段(花后115 d时),含油率达到较高水平,含水率、可溶性蛋白、可溶性糖和粗淀粉含量等均处于较稳定状态。因此‘凤丹’种子在花后115 d左右采收较为合适。
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