论文部分内容阅读
中药是中华民族长期医疗实践的经验总结和智慧结晶,几千年来对中华民族的生存繁衍做出了巨大贡献。丹参作为传统的中药材在我国沿用已久,其有效成分具有很高的药用价值。将丹参的有效成分进行有效的分离提纯,可以提高其药效,并促进中药标准化的发展。由于丹参中水溶性与脂溶性成分的化学性质相差较大,本次研究采用不同的方法对不同极性的物质进行分离,使分离效率提高,并制定了优化了丹参酮丹参酮ⅡA与丹酚酸B的提取工艺。采用中低压制备色谱方法分离提纯丹参脂溶性成分,此方法较传统常压柱层析,,能大大缩短分离时间,提高生产效率。选用500目硅胶固定相,选用乙酸乙酯和石油醚(9:1)的混合溶剂为流动相进行中低压柱层析。将所收集的洗脱液分别分析合并相同物质,分别重结晶,得到四个高纯度化合物。经分析,为丹参活性成分:二轻丹参酮,隐丹参酮,丹参酮Ⅰ,丹参酮ⅡA。水溶性成分用硅胶分离效果差,效率低,故采用高速逆流色谱法进行分离纯化。高速逆流色谱法具有无需固体载体,消除了样品的不可逆吸附的特点。且具有分离度高、重现性好、分离量大等优势。通过反复试验,确定建立石油醚-乙酸乙酯-甲醇-水-甲酸为两相溶剂系统,其K值为0.97,最佳纯化工艺条件为:转速1800 r/min,流速1.0 mL/min,温度30℃。得到的物质为淡绿色粉末,经甲醇重结晶,得无色粉末。纯化后的化合物经HPLC检测,其纯度大于98.00%经分析,为丹参活性成分:丹酚酸B。丹参酮ⅡA与丹酚酸B是丹参中主要的脂溶性与水溶性物质,常以这两种物质的提取含量作为脂溶性与水溶性成分提取标准。本次实验超声波辅助法提取这两种成分成分,运用外标法建立了丹参酮ⅡA与丹酚酸B的标准曲线,运用高效液相色谱测量丹参酮ⅡA与丹酚酸B的含量。通过综合单因素实验以及正交实验的结果,确定了丹参提取工艺的最优制备条件,并对丹参提取工艺进行了优化。单因素及正交实验的结果显示:丹参酮ⅡA工艺95%乙醇,使用13倍量的乙醇用量,超声时间为40min。丹酚酸B工艺:40%甲醇,液料比13倍,超声时间30 min。