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目的:观察右归丸含药大鼠血清对传代人退变椎间盘髓核组织中IL-1和TNF-α表达的影响,从而解释和证明炎性因子在椎间盘退变过程中的作用,补充与完善补益肝肾中药治疗肝肾亏虚型椎间盘退变的原理与优势,从而为中医药防治腰椎间盘退变提供可靠证据。
方法:选取48只成年SD大鼠,按照随机数字表法将其分为右归丸方血清组、桃红四物汤血清组及空白血清组,每组可平均分得16只,每天灌胃给药2次,具体时间为9时及17时,灌胃5天后,于第6天灌胃1小时后,腹主动脉采血,随后将血液离心,获取血清,56℃水浴,持续30分钟灭活,过滤血清,最后放入-20℃冰箱冻存待用。选取我校附属医院3例即将行椎管减压椎间盘摘除手术或椎间孔镜手术,根据中医学辨证为肝肾亏虚型,患者行腰椎手术后获取其椎间盘髓核组织,分离椎间盘髓核组织,采用胰酶消化法培养、传代,运用MTT实验方法,筛选出含最适合细胞生长的含药血清浓度,然后将培养的第3代椎间盘髓核组织标记为空白对照组、右归丸方组、桃红四物汤组,用已经筛选合适浓度的右归丸方血清、桃红四物汤血清及空白血清分别干预已传代椎间盘髓核组织,各组分别经过3天、7天和14天培养后,运用免疫印迹法检测3代髓核组织中IL-1和TNF-α的含量变化。
结果:免疫印迹法结果:两组含药血清组(右归丸方、桃红四物汤)相对于空白血清组髓核组织中IL-1和TNF-α表达下降,两组含药血清组相对于空白血清组IL-1和TNF-α灰度值有统计学差异(p<0.05);右归丸方血清组、桃红四物汤血清组人退变椎间盘髓核组织中IL-1和TNF-α蛋白表达水平与时间成反比;右归丸方血清组相对于桃红四物汤血清组中IL-1和TNF-α表达水平下降更加明显,右归丸方血清组相对于桃红四物汤血清组IL-1和TNF-α灰度值有统计学差异(p<0.05)。
结论:1.右归丸方、桃红四物汤通过对人退变椎间盘髓核组织中IL-1和TNF-α表达的抑制,减轻炎性反应,可延缓腰椎间盘退变。
2.右归丸方相对于桃红四物汤延缓椎间盘退变效果更加明显,补肾中药治疗腰椎间盘退变具有更好的疗效,更具优势。
方法:选取48只成年SD大鼠,按照随机数字表法将其分为右归丸方血清组、桃红四物汤血清组及空白血清组,每组可平均分得16只,每天灌胃给药2次,具体时间为9时及17时,灌胃5天后,于第6天灌胃1小时后,腹主动脉采血,随后将血液离心,获取血清,56℃水浴,持续30分钟灭活,过滤血清,最后放入-20℃冰箱冻存待用。选取我校附属医院3例即将行椎管减压椎间盘摘除手术或椎间孔镜手术,根据中医学辨证为肝肾亏虚型,患者行腰椎手术后获取其椎间盘髓核组织,分离椎间盘髓核组织,采用胰酶消化法培养、传代,运用MTT实验方法,筛选出含最适合细胞生长的含药血清浓度,然后将培养的第3代椎间盘髓核组织标记为空白对照组、右归丸方组、桃红四物汤组,用已经筛选合适浓度的右归丸方血清、桃红四物汤血清及空白血清分别干预已传代椎间盘髓核组织,各组分别经过3天、7天和14天培养后,运用免疫印迹法检测3代髓核组织中IL-1和TNF-α的含量变化。
结果:免疫印迹法结果:两组含药血清组(右归丸方、桃红四物汤)相对于空白血清组髓核组织中IL-1和TNF-α表达下降,两组含药血清组相对于空白血清组IL-1和TNF-α灰度值有统计学差异(p<0.05);右归丸方血清组、桃红四物汤血清组人退变椎间盘髓核组织中IL-1和TNF-α蛋白表达水平与时间成反比;右归丸方血清组相对于桃红四物汤血清组中IL-1和TNF-α表达水平下降更加明显,右归丸方血清组相对于桃红四物汤血清组IL-1和TNF-α灰度值有统计学差异(p<0.05)。
结论:1.右归丸方、桃红四物汤通过对人退变椎间盘髓核组织中IL-1和TNF-α表达的抑制,减轻炎性反应,可延缓腰椎间盘退变。
2.右归丸方相对于桃红四物汤延缓椎间盘退变效果更加明显,补肾中药治疗腰椎间盘退变具有更好的疗效,更具优势。