利谷隆对大鼠Leydig细胞合成睾酮毒性机制研究

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[目的]探讨利谷隆对SD大鼠体外培养睾丸间质细胞(Leydigcells)睾酮合成的影响。[方法]建立SD大鼠睾丸Leydig细胞体外原代培养体系,利谷隆染毒剂量组分为0,50,100,200μmol/L。放射免疫法测定睾酮浓度,实时荧光定量PCR(Real-timePCR)检测Leydig细胞的细胞色素P450侧链裂解酶(P450scc)、3β-羟基固醇脱氢酶(3β-HSD)的mRNA表达,ELISA检测利谷隆分别染毒24h和48h后Leydig细胞P450scc、3β-HSD蛋白表达情况。[结果]Leydig细胞睾酮合成水平呈下降趋势,与对照组比较,100μmol/L、200μmol/L剂量组差异有统计学意义(P<0.05)。与对照组比较,随着染毒剂量的增加P450scc的mRNA表达降低,差异有统计学意义(P<0.05);与对照组比较,随着染毒剂量的增加3β-HSD的mRNA表达降低,差异有统计学意义(P<0.05)。染毒24小时,与对照组比较,P450scc蛋白表达各剂量组均无明显差异(P>0.05);与对照组比较,随着染毒剂量的增加3β-HSD的蛋白表达降低(P<0.05),且呈剂量效应关系。染毒48小时,与对照组比较,随着染毒剂量的增加P450scc的蛋白表达降低,差异有统计学意义(P<0.05);与对照组比较,随着染毒剂量的增加3β-HSD的蛋白表达降低(P<0.05),且呈剂量效应关系。[结论]利谷隆可能通过抑制Leydig细胞P450scc和3β-HSD的活性,降低睾酮激素水平。
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