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目的:探讨miR-34a对前列腺癌细胞株的化疗敏感性的影响方法:第一部分,MTT检测miR-34a、5-Aza对两株PCa细胞增殖的影响:1.mimicNC、miR-34a mimic转染与5-Aza去甲基化分别处理两株PCa细胞PC-3、DU145 48h;2.MTT检测各组PCa细胞在波长为570nm的吸光值(时间0/24/48/72h)分组:PC-3:Con组、pre-Con组、pre-miR-34a组、5-Aza组;DU145:Con组、pre-Con组、pre-miR-34a组、5-Aza组。第二部分,MTT检测miR-34a、5-Aza对两株PCa细胞耐药性的影响:1.mimicNC、miR-34a mimic转染与5-Aza去甲基化分别处理两株PCa细胞PC-3、DU145 48h;2.同时分别选择不同浓度的Dox和Topo作用于各组PCa细胞48h(Dox浓度:0、0.0625、0.125、0.25、0.5、1.0、2.0umol/L;Topo浓度:0、0.0195、0.078、0.3125、1.25、5.0mg/L);3.MTT检测各组PCa细胞在波长为570nm的吸光值,并分别计算Dox和Topo在各组PCa细胞中的IC50值。分组(两种化疗药物):Con组、pre-con组、pre-miR-34a组、5-Aza组。第三部分,流式细胞术检测Dox、Topo、5-Aza与miR-34a对两株PCa细胞凋亡的影响:1.miR-34a mimic转染与5-Aza去甲基化分别处理两株PCa细胞PC-3、DU145细胞48h;2.流式细胞术检测各组PCa细胞的凋亡率;分组(两株PCa细胞):Con组、Dox组、Topo组、pre-miR-34a组、pre-miR-34a+Dox组、pre-miR-34a+Topo组、5-Aza组、5-Aza+Dox组、5-Aza+Topo组。结果:mimicNC、miR-34a mimic转染和5-Aza去甲基化分别处理PCa细胞PC-3、DU145后,MTT检测结果显示:miR-34a mimic转染或5-Aza去甲基化处理组的两株PCa细胞在波长为570nm的吸光值低于mimicNC处理组和空白处理组;表明miR-34a mimics转染或5-Aza去甲基化诱导miR-34a表达上调能抑制PCa细胞PC3、DU145的增殖。添加不同浓度的Dox、Topo药物处理后,MTT测定Dox、Topo在各组PCa细胞中的IC50值显示:miR-34a mimic转染组或5-Aza去甲基化组处理后的两株PCa细胞,Dox、Topo的IC50值比mimicNC处理组和空白处理组低;表明miR-34a mimics转染或5-Aza去甲基化诱导miR-34a表达上调能够降低Dox、Topo对两株PCa细胞的IC50值,提示miR-34a mimics转染或5-Aza去甲基化诱导miR-34a上调能提高Dox、Topo对PCa细胞PC3、DU145的化疗敏感性。进一步通过流式细胞术检测结果显示:Dox组、Topo组、pre-miR-34a组、5-Aza组与Con组相比,两株PCa细胞的凋亡率显著增加;pre-miR-34a+Dox(Topo)组与单独Dox组、Topo组、pre-miR-34a组相比,两株PCa细胞的凋亡率增加;同样,5-Aza+Dox(Topo)组与单独Dox组、Topo组、5-Aza组相比,两株PCa细胞的凋亡率增加;这表明,miR-34a mimics转染或5-Aza去甲基化诱导miR-34a上调能促进PCa细胞PC-3、DU145的凋亡,增强Dox、Topo对PCa细胞PC-3、DU145的化疗敏感性。结论:1.miR-34a可能抑制PCa细胞的增殖。2.miR-34a可能促进PCa细胞的凋亡。3.miR-34a可能增加PCa细胞的化疗敏感性。