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本文由2个大鼠(Rattus norvegicus)品系(Sprague Dawley、Wistar)和2个小鼠(Mus musculus)品系(Balb/c、KM)的血清与人红细胞的凝集实验,观察到未经A、B或H抗原免疫的这4种鼠类血清都能与人A型、B型、AB型和O型红细胞发生不同程度的凝集,推测ABO血型抗体(抗A、抗B或抗H)可能普遍存在于大鼠和小鼠血清中。
为对红细胞的凝集原因做进一步研究,应用凝集抑制实验和ELISA实验,证明了大鼠和小鼠血清中不但普遍存在IgM型ABO天然抗体,还同时存在着IgG型的ABO天然抗体;通过Protein G亲和纯化和吸收放散的方法,直接纯化出了SD大鼠血清中的ABO天然抗体,结合Western blot杂交分析直接证明了IgG型ABO天然抗体的存在(本实验室早期已经纯化出IgM型抗体)。
通过在SPF级实验室中饲养SD大鼠,每10天采血分析血清中IgM型和IgG型ABO天然抗体的含量,探索了ABO天然抗体随个体年龄的变化情况。在此基础之上,通过抽提人的ABO红细胞膜脂,制备带ABO抗原的聚苯乙烯微球载体,纯化出了成年SD大鼠的抗B天然抗体;最后以所纯化的天然抗体作为标准,初步测定了成年SD大鼠个体中IgM型和IgG型抗B天然抗体的含量。
本文较全面地探索了大鼠和小鼠血清中ABO天然抗体的存在情况,弥补了动物血型系统中ABO天然抗体研究的不足;其次,本文也为开展ABO血型不亲和的组织移植及其免疫排斥机理的研究和利用ABO天然抗体来提高抗原递呈效率及其机理的研究,提供了合适的动物模型;再者,本文结合大鼠和小鼠血清中的ABO天然抗体的研究结果和文献中报道的ABO血型抗原的相关研究,提出了一个免疫学新观点:抗原及其对应的抗体,在健康个体中不一定是“有”和“无”的关系,可以同时存在而不引起自身免疫性疾病,并且存在着数量反比效应,即自身抗原弱则抗体强,自身抗原强则抗体弱;它们之间在一定的阈值内维持着平衡关系,不同的个体、不同的生理状态、不同的抗原-抗体对可能具有不同的阈值,阈值内的平衡具有积极的生理学意义,一旦某种因素导致抗原或抗体突破阈值而打破平衡,就会发生自身免疫性疾病。