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目的:研究证实miRNA在多种肿瘤中具有能够诱导细胞周期阻滞,促进细胞凋亡,抑制肿瘤细胞增殖和转移的生物学作用。大量的基础研究证明microRNA-145(miR-145)对肿瘤具有明显的抑制性作用,它能够通过作用于肿瘤中多个癌基因的表达参与肿瘤的发生和发展过程。本实验主要研究miR-145在胆管癌细胞株中的抑制细胞增殖的作用和具体的调控机制以揭示胆管癌可能的发病机制。 方法:(1)培养胆管癌细胞株ICC-9810和RBE,以及正常胆管上皮细胞株HIBEC;(2)采用荧光实时定量聚合酶链反应(Real-time PCR)检测胆管癌细胞株中miR-145的异常表达情况;(3)采用瞬时转染技术把使miR-145在胆管癌细胞中过表达,然后研究miR-145的功能;(4)miR-145过表达变化后,采用荧光实时定量聚合酶链反应(Real-time PCR)检测miR-145过表达变化后对其靶点在mRNA的影响;(4)采用CCK-8实验检测miR-145过表达变化后对胆管癌细胞株ICC-9810和RBE细胞增殖的影响; 结果:(1)胆管癌细胞株ICC-9810和RBE中miR-145的表达明显低于正常细胞HIBEC;(2)miR-145在胆管癌细胞株ICC-9810和RBE中过表达后,其靶基因(Bcl-2,CDK6,CCND1,E2F3,C-myc)的mRNA表达水平相对于阴性对照组会有不同程度的降低,表明;(4)miR-145在胆管癌细胞株ICC-9810和RBE中过表达后,胆管癌细胞株的细胞增殖速度在转染后转染48小时后增殖速度明显降低。 结论:miR-145在胆管癌细胞中呈现明显低表达,通过对靶基因不同程度的调控抑制胆管癌细胞的增殖速度,可能参与胆管癌的发病机制过程。