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目的:食管鳞状细胞癌(esophageal squamous cell carcinoma，ESCC)是最常见的消化系统恶性肿瘤之一。我国是食管癌的高发地区，每年新发病人数占世界食管癌发病人数的一半以上。中国境内约80％的食管癌患者发生在太行山区，包括河北的磁县、涉县、武安和河南的林州等地，是食管癌的集中高发区，也是世界食管癌的第一高发区，严重地威胁着人民的健康。 细胞周期检测点激酶1（checkpoint kinase1， Chk1），是生物进化过程中非常保守的蛋白激酶。作为在进化上比较保守的丝氨酸/苏氨酸激酶，不仅是细胞分裂过程中所必须，而且对于细胞分裂过程中保持基因的稳定也非常重要。Rad51基因是细胞DNA损伤后同源重组修复系统中的重要成员，对于维持基因的稳定性，保证生物特性持续、稳定的遗传起着重要的作用。 本项研究应用RT-PCR和免疫组织化学方法检测Chk1和Rad51mRNA和蛋白在食管鳞癌及癌旁组织中的表达，并结合临床资料评价其表达与组织分级和临床分期之间的关系，为进一步研究食管鳞癌的发生发展机制提供参考依据，并为食管鳞癌的预防、诊治提供临床指标。 方法: 1.应用逆转录-聚合酶链反应(reverse transcription polymerase chainreaction，RT-PCR)法检测96例食管鳞状细胞癌组织及相应癌旁非肿瘤组织中CHK1和Rad51基因的mRNA表达情况。 2.应用免疫组织化学(immunohistochemistry, IHC) SP法检测96例食管鳞状细胞癌组织及相应癌旁非肿瘤组织中Chk1和Rad51蛋白的表达情况。 3.运用统计软件SPSS12.0对数据进行统计学分析。 结果: 1.Chk1和Rad51基因mRNA的表达 1.1 Chk1 mRNA的表达Chk1基因mRNA在食管癌和癌旁组织的表达量分别为0.626±0.271和0.317±0.192，食管癌组织中mRNA的表达量明显高于癌旁常组织，两者的差异有统计学意义(t=6.382，P=0.000＜0.01)。 在ESCC组织中，Chk1 mRNA表达与患者的性别、年龄无关(P＞0.05);按肿瘤病理学分级，Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ级组Chk1 mRNA表达量分别为0.462±0.250、0.477±0.265、0.818±0.333，Ⅰ、Ⅱ级组mRNA的表达经统计学分析与Ⅲ级组具有显著性差异，(t=10.627，P=0.000＜0.01);有淋巴结转移组(0.875±0.235)Chk1 mRNA表达量比无淋巴结转移组(0.602±0.274)明显增高，经统计学分析，两组之间具有显著性差异(t=4.018，P=0.025＜0.05)。Chk1 mRNA在深层浸润组癌组织中相对表达量(0.957±0.109)高于浅层浸润组(0.694±0.034)，经统计学分析，两组之间具有非常显著性差异(t=12.276，P=0.000)。 1.2 Rad51mRNA表达Rad51基因mRNA在食管癌和癌旁组织中的相对表达量分别为0.783±0.358、0.414±0.278，前者明显高于后者，经统计学分析，两组的差异有统计学意义(t=4.510，P=0.003＜0.05)在ESCC组织中，Rad51 mRNA表达与患者的性别、年龄无关(P＞0.05);按肿瘤病理组织学分级，Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ级之间组mRNA表达量经统计学分析没有明显差异(t=1.081，P=0.08＞0.05);在有无淋巴结转移分组中，经统计学分析，两组之间无显著性差异（t=0.981，P=0.195＞0.05）。Rad51 mRNA在深层浸润组癌组织中相对表达量(0.841±0.304)高于浅层浸润组(0.608±0.310)，经统计学分析，两组之间具有显著性差异(t=5.081.，P=0.004＜0.05)。 2. Chk1和Rad51蛋白的表达 2.1 Chk1蛋白的表达Chk1在ESCC组织中的表达阳性率为67.71％(65/96)，在癌旁组织中的表达阳性率为29.17％(28/96)。ESCC组织中Chk1蛋白的阳性表达率明显高于癌旁组织，经统计学分析有非常显著差异（X2=15.834 P＜0.01） Chk1蛋白的表达与患者的性别、年龄无关（P＞0.05）;按肿瘤病理组织学分级，Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ级蛋白阳性表达率分别为57.14％(20/35)、64.71％(22/34)、85.19％(23/27)，Ⅰ+Ⅱ级组的表达率显著低于Ⅲ级组，经统计学分析具有显著差异（X2=5.248，P=0.022＜0.05）;无淋巴结转移组Chk1蛋白表达率为47.73％(21/44)，有淋巴结转移组的蛋白表达率为84.62％(44/52)，经统计学分析，两组之间有显著性差异(X2=14.833，P=0.000＜0.01)。Chk1蛋白在深层浸润组癌组织中的阳性表达率为76.39％(55/72)，高于浅层浸润组的阳性表达率41.67％(10/24)，经统计学分析，两组之间具有非常显著性差异（X2=9.926，P=0.002＜0.01）。 2.2 Rad51蛋白的表达在ESCC组织中Rad51蛋白阳性表达率为58.33％(56/96)，而对应的癌旁组织中的阳性表达率为31.25％(30/96)，经统计学分析ESCC组织的阳性表达率显著高于癌旁组织（X2=14.238，P=0.000＜0.01）。 在ESCC组织中，Rad51蛋白表达与患者的性别、年龄无关(P＞0.05);按肿瘤病理组织学分级，Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ级组Rad51蛋白表达阳性率分别为51.43％(18/35)、61.76％(21/34)、62.96％(17/27)，三组之间蛋白表达阳性率有增高的趋势，经统计学分析，三组之间没有明显差异(X2=1.089，P=0.580＞0.05);有淋巴结转移组Rad51阳性表达率为61.54％(32/52)比无淋巴结转移组的54.55％(24/44)稍有增高，经统计学分析，两组之间无显著性差异（X2=0.480，P=0.489＞0.05）。Rad51蛋白在深层浸润组癌组织中阳性表达率为61.11％(44/72);浅层浸润组阳性表达率为50.00％(12/24)，经统计学分析，两组之间未见显著性差异(X2=0.914，P=0.339＞0.05)。 3.ESCC组织中Chk1蛋白和Rad51蛋白表达的相关性分析在ESCC组织中，Chk和Rad51蛋白表达呈正相关(r=0.481，P=0.026＜0.05)。 结论: 1.食管癌组织中Chk1和Rad51的mRNA和蛋白表达明显增高，可能和食管癌的发生有关。 2.Chk1的mRNA和蛋白的高表达与淋巴结转移、肿瘤组织学分级、肿瘤的侵袭等食管癌恶性生物学行为相关，提示Chk1可能参与了食管癌的浸润、转移。 3.Rad51的mRNA和蛋白表达与食管癌的组织学分级、淋巴结转移及侵袭深度无关。 4.食管癌组织中Chk1和Rad51蛋白表达呈正相关。