目的:随着人们生活方式和饮食结构的改变,高脂血症(Hyperglipemia,HLP)发病率逐年升高。高脂血症能增加动脉壁细胞内自由基释放系统的活性,损伤动脉壁抗氧化机能,导致血管内皮损伤,引起内皮形态及功能异常,终至动脉粥样硬化(atherosclerosis,AS)形成。超氧化物歧化酶(Superoxide dismutase,SOD)和丙二醛(Malondialdehyde,MDA)是反应氧化-抗氧化平衡的经典指标。核因子E2相关因子2(Nuclear factor E-2-related 2,Nrf2)是抗氧化应激的核心转录因子。早期预防和治疗高脂血症,可以延缓和减少动脉粥样硬化性疾病的发生,提高人群的生活质量,降低致残致死率。本实验通过对急性高脂血症大鼠预防性应用姜黄素,观察急性高脂状态对内皮形态和功能的影响以及氧化应激指标的变化,探讨姜黄素保护内皮、调节氧化应激状态的作用和机制。方法:1大鼠分组及预防性用药:健康成年雄性Sprague-Dawley大鼠40只,按体重随机分为正常对照组(NC组,n=8)、模型组(n=8只)、低剂量姜黄素组(125mg/kg.d姜黄素化合物组,LC组,n=8)、高剂量姜黄素组(250mg/kg.d姜黄素化合物组,HC组,n=8)、阿托伐他汀组(他汀组,n=8)。NC组、模型组给予2.5ml/kg玉米油灌胃,LC组、HC组、他汀组分别给予125mg/kg.d、250mg/kg.d姜黄素化合物及2.1mg/kg.d阿托伐他汀(均为2.5ml/kg)每日灌胃1次,连续10d。2制备急性高脂血症大鼠模型:第10d灌胃1h后,模型组、LC组、HC组、他汀组均给予75%蛋黄乳液25ml/kg腹腔注射制造急性高脂血症模型,NC组给予生理盐水25ml/kg腹腔注射。3一般情况观察:试验期间每天观察各组大鼠的活动情况、精神状态,记录体重变化。4制备标本及检测指标:腹腔注射蛋黄乳液或生理盐水24h后取血检测总胆固醇(TC),甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、葡萄糖(GLU)、氧化低密度脂蛋白胆固醇(ox LDL)、SOD活力、一氧化氮(NO)。然后麻醉大鼠取腹主动脉,部分采用戊二醛低温速冻切片,用于HE染色观察形态学变化,免疫组化法测定腹主动脉中Nrf2表达水平;部分-80℃冷藏用于测定腹主动脉MDA含量。5统计学分析符合正态分布计量资料以x±s表示,采用SPSS13.0软件进行统计学分析,多组间数据比较用单因素方差分析,两两比较用LSD检验,P<0.05为差异有统计学意义。结果:1一般情况各组大鼠一般状况良好,体重稳定增长,反应灵敏。各组大鼠体重差别无统计学意义(P>0.05)。2注射蛋黄乳液24h后大鼠血脂升高,表现为TC、TG、LDL-C升高,HDL-C降低,认为急性高脂血症模型成立。3血脂水平3.1模型组大鼠血脂与NC组比较结果与NC组比较,模型组大鼠血清TC、TG、LDL-C水平升高,血清HDL-C水平降低(P<0.05)。3.2药物干预组大鼠血脂与模型组比较结果HC组、他汀组血清TC、TG水平均较模型组降低(P<0.05);LC组血清TC、TG较模型组有降低趋势,但无统计学差异(P>0.05)。LC组、HC组、他汀组血清LDL-C水平较模型组均有降低趋势,但无统计学差异(P>0.05)。HC组血清HDL-C与模型组比较,无统计学差异(P>0.05)。LC组、他汀组血清HDL-C则较模型组降低(P<0.05)。3.3药物干预组间血脂比较结果HC组、LC组、他汀组TC、TG、LDL-C水平无统计学差异(P>0.05)。HC组血清HDL-C较LC组、他汀组升高(P<0.05),LC组、他汀组血清HDL-C无统计学差异(P>0.05)。4肝功能、葡萄糖水平各组大鼠肝功能指标、血糖无统计学差异(P>0.05)。5腹主动脉HE染色结果NC组大鼠腹主动脉内膜光滑、完整,无隆起,平滑肌及弹力纤维排列规则,未见平滑肌细胞增生,外膜未见异常;模型组大鼠腹主动脉内膜不连续,局部隆起,部分脱落,中膜平滑肌细胞及弹力纤维排列紊乱,外膜未见异常。LC组大鼠腹主动脉内膜连续,局部隆起,弹力纤维、平滑肌细胞排列不规则;HC组大鼠腹主动脉内膜完整,无隆起,弹力纤维及平滑肌细胞排列稍不规则;他汀组大鼠腹主动脉内膜完整,局部可见隆起,弹力纤维及平滑肌细胞排列不规则。6免疫组织化学结果模型组腹主动脉的Nrf2阳性细胞数较NC组增加(+44%,P<0.05)。与模型组相比,LC组(+69%,P<0.05)、HC组(+147%,P<0.05)和他汀组(+51%,P<0.05)的Nrf2阳性细胞数均显著增加。与他汀组比较,LC组(+12%,P<0.05)Nrf2阳性细胞数显著增加,HC组(+64%,P<0.05)Nrf2阳性细胞数显著增加,且HC组(+46%,P<0.05)Nrf2阳性细胞数多于LC组。7 SOD、MDA结果血清SOD活力:模型组SOD活力较NC组减弱(P<0.05)。LC组、HC组、他汀组SOD活力与模型组相比增强(P<0.05)。HC组、他汀组SOD活力与LC组比较增强(P<0.05),HC组、他汀组SOD活力无统计学差异。腹主动脉MDA含量:模型组MDA含量高于NC组(P<0.05);LC组、HC组、他汀组的MDA含量低于模型组(P<0.05)。HC组的MDA含量低于LC组和他汀组(P<0.05),LC组、他汀组的MDA含量无统计学差异(P>0.05)。8血清NO模型组NO含量低于NC组(P<0.05)。LC组、HC组、他汀组NO含量与模型组相比均有显著增加(P<0.05)。HC组NO含量高于LC组和他汀组(P<0.05),LC组和他汀组NO含量无统计学差异(P>0.05)。9 ox LDL结果模型组血清ox LDL含量高于NC组(P<0.05)。HC组、他汀组的ox LDL含量与模型组相比降低(P<0.05),LC组ox LDL含量与模型组相比无统计学差异(P>0.05)。HC组和他汀组ox LDL含量均低于LC组(P<0.05),HC组和他汀组ox LDL含量无统计学差异(P>0.05)。结论:1应用75%蛋黄乳液腹腔注射成功制备急性高脂大鼠模型。急性高脂大鼠模型出现了腹主动脉内皮损伤,包括形态学改变(内膜不光滑)和功能损伤(NO含量降低);急性高脂大鼠抗氧化能力减弱表现为脂质过氧化产物ox LDL、MDA增加,SOD活力减弱。2低剂量姜黄素(125mg/kg.d姜黄素化合物)、高剂量姜黄素(250mg/kg.d姜黄素化合物)及阿托伐他汀均可降低急性高脂血症模型大鼠血脂,250mg/kg.d降脂效果优于125mg/kg.d。姜黄素和阿托伐他汀可能通过上调腹主动脉Nrf2表达,增强动脉抗氧化应激能力,减轻腹主动脉病理损伤。