论文部分内容阅读
小麦是世界上最重要的粮食作物之一,小麦1B染色体短臂被黑麦1R染色体短臂取代形成了小麦-黑麦1BL.1RS易位系。小麦-黑麦1BL.1RS易位系携带有许多与疾病抗性和产量形成有关的有益基因,在全世界小麦遗传改良中被广泛的运用。本研究选用含有1BL.1RS易位系的功能持绿小麦品种CN17, CN12、CN18以及普通小麦MYll、中国春和黑麦作为研究材料。同时以CN17和MY11为亲本分别构建了杂交组合CN17/MY11和MY11/CN17的遗传群体F1、F2、F3和F4。通过DNA分子标记与细胞学技术相结合,对与叶片衰老相关的EST序列进行了染色体定位,并且分析了母本效应对易位染色体传递频率的影响,主要结果如下;1.通过抑制性差减杂交,从CN17中得到32条与叶片衰老相关的EST序列,利用电子克隆将其中31条定位于不同的染色体之上。对得到的32条EST序列设计引物,总共设计得到19对EST-STS引物。运用这些引物对中国春、CN12、CN17、CN18和黑麦的基因组总DNA进行PCR扩增。发现有5对引物有多态性,分别为JK738991, JK738983, JK738989, JK738994和JK739003。2.用中国春缺四体对5对多态性EST-STS引物进行染色体定位。其中3对EST-STS引物能被定位在特定的染色体上:JK738991定位于3B(电子克隆定位在1A);JK738983定位于5D(电子克隆定位在6A、6B和6D);JK738989有3个多态性条带(JK738989-A, JK738989-B, JK738989-C)分别定位于2A,4A和3D(电子克隆定位于2B)。JK738994和JK739003用中国春缺四体无法定位。用由MY11/CN17为亲本构建的F2群体对JK738994, JK739003与1BL.1RS进行连锁分析。发现上述标记与易位染色体均不连锁3.选用6对已报道的能稳定扩增的特异性引物对遗传群体进行基因型鉴定。绝大部分能够稳定扩增,但是个别单株出现了特异带的缺失或倍增。证明了1RS上的标记位点虽然在大多数小麦背景中较能稳定的存在,但是在少数个体中分子标记位点存在一定的变异。4.在3个一同的世代中,正反交组合杂合子的比例均小于理论值50%,易位系纯合子所占的比例小于不含易位染色体的纯合子比例,且小于理论值25%,而不含易位染色体纯合子大于25%。经过χ2分析,都偏离了1:2:1的分离比例。基于本实验结果,我们得出结论,在本实验的杂交组合中1BL.1RS易位染色体在传递过程中,雌雄配子均发生了选择。5.易位染色体的传递频率在正交组合(CN17/MY11)三个世代分别为:68.4%、63.8%、66.4%;反交组合(MY11/CN17)为:62.3%、63.7%、65.7%。正反交组合呈现相反的趋势,正交逐渐降低而反交逐渐升高,但是正交依然高于反交。通过以上数据我们得出结论,细胞质遗传背景可能会影响该易位染色体的遗传。