盐度对草鱼肉质和肠道菌群的影响研究

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草鱼是我国重要的淡水养殖鱼类,其养殖产量位居我国淡水养殖鱼类之首。随着草鱼养殖密度的提高,使用配合饲料代替草对草鱼进行投喂等原因,草鱼的品质越来越差。提高草鱼的品质对于草鱼高效养殖具有重要的意义。实践证明,在一定盐度的水中养殖草鱼(称为“海鲩”),可以提高其品质,但是其机理不清楚。本研究把草鱼养殖在0‰(淡水,对照组)、5‰和10‰盐度的水中,对其肉质和肠道微生物组成进行研究。主要研究结果如下:1、盐度对草鱼鳃和肠道的影响。通过苏木精-伊红(HE)染色可以观察到,和对照组相比,在5‰盐度和10‰盐度组中的鳃丝上的细胞数量显著减少,细胞间的间隙增大。在5‰和10‰盐度组中,肠道绒毛中出现了大量的空泡,且组织稀疏不致密,并随着处理时间的增长,差异越明显。PAS染色的结果发现,肠道中的糖类显著减少,并随着盐度的升高,效果越明显,在第14天,肠道中的紫红色颗粒显著降低。Tunel染色结果显示,与对照组相比处理组的肠道细胞发生了凋亡现象,且10‰盐度组中效果最明显。2、盐度对草鱼肌肉的影响。和对照组相比,在5‰盐度和10‰盐度组中草鱼肌肉纤维排列更紧密,排列更规则,呈现多角形,密度增大,纤维束间隙较大。质构仪分析结果显示,和对照组相比,5‰和10‰盐度组中肉质硬度、弹性、粘着性和咀嚼度随着盐度的增加而增加,10‰盐度组在回复性却有所下调。氨基酸成分分析结果显示,在5‰和10‰盐度组中所有检测的氨基酸含量高于对照组(P<0.01)。3、盐度对草鱼肠道影响。为了探讨盐度对草鱼的消化和吸收影响,我们采集对照组、5‰和10‰盐度组草鱼的肠道组织,并进行转录组分析。q RT-PCR检测多个基因结果和转录组结果比较一致,表明转录组结果可靠。转录组分析结果显示,和对照组相比,5‰盐度组一共有924个差异基因,其中330个上调基因,594个下调基因;10‰盐度组一共有710个差异基因,其中423个上调基因,287个下调基因。KEEG信号通路分析结果显示,两个实验组都富集了脂肪酸合成相关基因、PPAR-γ信号通路、碳水化合物代谢相关通路,表明在有盐度的养殖水环境,促进了脂肪和碳水化合物代谢相关通路。4、盐度对草鱼肠道菌群的影响。为了探讨盐度对草鱼肠道菌群的影响,我们采集对照组、5‰和10‰盐度组草鱼的肠道组织,并对其菌群进行了分析。16s RNA基因结果表明,对照组、5‰和10‰盐度组肠道菌群α-多样性指数和β-多样性指数变化不明显。在门分类等级上,与对照组相比,5‰和10‰盐度组草鱼肠道中Proteobacteria、Fusobacteriota、Firmicutes的相对丰度有所增加,而Cyanobacteria、Verrucomicrobiota、Actinobacteriota则出现了明显的下降。酶活检测结果显示,经过5‰和10‰盐度的处理后草鱼肠道中的超氧化物歧化酶(Superoxide dismutase,SOD)活力降低,而过氧化氢酶(Catalase,CAT)和谷胱甘肽过氧化物酶(Glutathione peroxidase,GSH-Px)的活力均有所增加。
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