马尾松树皮提取物诱导三种癌细胞凋亡的细胞与分子机理研究

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松树皮提取物是一种多酚类混合物。多个研究表明该混合物在体外和体内均具有强大的抗氧化作用,对循环系统、免疫系统、神经系统和生殖系统方面的疾病具有预防和治疗作用。本研究以癌细胞凋亡为切入点,在体外以人乳腺腺癌MCF-7,宫颈癌Hela和卵巢癌HO8910细胞系为对象,对中国马尾松(Pinusmassoniana)树皮提取物PMBE诱导癌细胞凋亡的细胞和分子机理作了由浅入深的研究。通过细胞生物学手段,本研究证实PMBE在0~120ug/ml的剂量范围内和在0~72h连续作用时间内对上述三种癌细胞有剂量和时间相关的生长抑制活性,并通过DAPI荧光显微分析证明PMBE对癌细胞具有诱导凋亡的作用,该怍用可以通过TUNEL实验加以证实。通过电子显微镜的亚细胞水平分析,PMBE诱导的癌细胞凋亡事件发生部位位于线粒体,免疫印迹获得的证据表明凋亡细胞中Procaspase-9被激活,正常状态下位于线粒体膜内腔的细胞色素c被释放到细胞质。同时,无血清状态下的相同研究表明,处于血清饥饿状态下的癌细胞对PMBE毒性的敏感性有明显的增强。另外,本研究发现在PMBE触发的癌细胞凋亡事件中,基质酶基因MT-SPl及其蛋白抑制剂HAI-l基因的mRNA水平表达被下调,推测这种调控是通过PMBE或与PMBE有潜在作用的未知因子在凋亡事件中通过作用到两基因的LDL受体结构域上而实现的。本研究为实现PMBE在预防和治疗癌症上的药用价值提供了细胞学和分子生物学的理论基础。
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