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D-荞麦碱(D-fagomine),即1,2-双脱氧野尻霉素,是一种六元环亚胺基环多醇,最早是在荞麦中发现并将其分离纯化的,也存在于其他植物如桑叶和枸杞中。D-荞麦碱是碳水化合物的类似物,羟基的空间构型和糖(如葡萄糖)一样,不一样的是氮元素取代了碳水化合物的内环氧。最近研究表明,D-荞麦碱在肠道中发挥着双重作用:首先,D-荞麦碱是肠道糖苷酶的抑制剂,可以通过抑制糖苷酶有效地延缓蔗糖和淀粉的分解,从而降低血糖浓度;其次,选择性的凝集肠杆菌科,如大肠杆菌、鼠伤寒沙门氏菌,促进益生菌粘附到肠粘膜。荞麦中的D-荞麦碱作为一种亚胺糖对降低餐后血糖、改善糖尿病人的血糖水平有较好的疗效,但是由于D-荞麦碱没有发色团,不能用简单的分光光度法测定其含量,而气相色谱(GC)和蒸发光散射检测器(ELSD)用于检测荞麦碱时的前处理较麻烦、质谱(MS)的成本较高。因此,本研究利用芴甲氧酰氯试剂进行柱前衍生,赋予D-荞麦碱荧光发色团,然后使用高效液相色谱荧光检测器(HPLC-FLD)检测其含量,从而建立D-荞麦碱简单、快速的检测方法。本研究的目的是针对现有技术存在的不足、缺陷,利用芴甲氧酰氯柱前衍生高效液相色谱-荧光检测器,建立一种D-荞麦碱的检测方法,并对衍生物的稳定性、方法的精密度、准确度、灵敏度进行了研究。此外,本研究利用上述建立的柱前衍生高效液相色谱-荧光检测器的检测方法研究了荞麦中D-荞麦碱的存在形式、分析测定了荞麦不同部位及不同品种荞麦中D-荞麦碱的含量。研究结果如下:(1)柱前衍生高效液相色谱-荧光检测器法测定D-荞麦碱的标准曲线方程为Y=6×10~6X+19514,R~2=0.999;(2)试验结果表明该衍生物可以在4℃冰箱中较稳定的保存3天、进样精密度RSD为0.73%、重复性RSD为3.67%、准确度(平均加标回收率)为106.38%、灵敏度(LOD和LOQ)分别为14.5μg/Kg、43.9μg/Kg;(3)试验结果表明荞麦不同部位中D-荞麦碱的含量具有显著性差异,其中荞麦粉中含量最高,平均可达3.61 mg/Kg、其次为荞麦麸粉,平均可达2.60 mg/Kg、而壳中含量最少,平均为2.39 mg/Kg;(4)试验结果表明荞麦不同品种间D-荞麦碱的含量也显著不同,定甜1号(12.79±0.18 mg/Kg)、陇甜1号(11.83±0.42 mg/Kg)含量较高;榆6-21(4.39±0.09 mg/Kg)的含量最低;分析结果表明,甜荞中D-荞麦碱的含量显著高于苦荞。