恶性肿瘤严重危害人类健康,目前常规的手术和放化疗等治疗方法均不能彻底清除体内的癌细胞,体内回输免疫活性细胞的过继免疫治疗法可以直接杀伤肿瘤细胞,还可调节和增强机体免疫力,从而成为肿瘤治疗的重要辅助手段。其中,细胞因子诱导的杀伤细胞(CIK细胞)是近年来发现的一种新型过继免疫抗肿瘤细胞,它是从人血液分离出来的单核淋巴细胞经IL-2、CD3单抗等细胞因子诱导培养产生的以CD3~+CD56~+T细胞为主的异质细胞群,兼具T淋巴细胞强大抗肿瘤活性和NK细胞非MHC限制性杀瘤功能。CIK细胞的增殖和杀瘤活性依赖于多种细胞因子及外源因子的刺激,何种因子组合为最佳还有待研究。卡介菌多糖核酸是一种新型免疫调节剂,它能提高机体免疫力,诱导多种免疫细胞的活化,并且辅助提高肿瘤治疗。目前国内外还没有BCG-PSN联合CIK进行研究的相关报道,因此本论文将两者结合起来研究。在CIK细胞的培养过程中加入卡介菌多糖核酸,研究其对CIK细胞体外增殖及杀瘤活性方面的影响,并且初步探讨了卡介菌多糖核酸可能从哪些方面改变CIK细胞毒活性。首先,本研究采用CCK-8法检测了不同浓度的卡介菌多糖核酸对CIK细胞增殖以及对CIK杀伤肝癌细胞系SMMC-7721效果的影响,结果发现,10μL/m L的卡介菌多糖核酸能够显著促进CIK细胞的体外增殖活性及杀瘤活性,且杀伤效果随着效应细胞/靶细胞比例的增加也逐渐增强。然后,运用荧光定量PCR检测了Perforin、Granzyme B、INF-γ、TNF-a、TNF-β、Fas这几种重要的CIK毒活性因子m RNA的表达,结果显示卡介菌多糖核酸处理后的CIK细胞Perforin、Granzyme B、INF-γ、TNF-a、TNF-β、Fas m RNA的表达相比对照组都有明显提高。接着,我们用ELISA检测了CIK细胞INF-γ、TNF-a的分泌量,结果表明卡介菌多糖核酸处理后的CIK细胞INF-γ、TNF-a释放量相比对照组有增加。最后,采用流式细胞术检测了CIK不同淋巴亚群的含量,发现卡介菌多糖核酸处理后的CIK细胞表面CD3~+CD4~+、CD3~+CD56~+抗原分子含量显著提高。总之,本研究证实卡介菌多糖核酸能剂量依赖性促进CIK细胞增殖,又能提高CIK的杀瘤效果,说明卡介菌多糖核酸可以作为一种较好的免疫佐剂来辅助提高CIK过继免疫治疗。另外CIK细胞杀瘤效率提高的同时其相关毒活性因子的表达与释放都增加,揭示其可能是杀伤肿瘤细胞的途径之一,这也可以为进一步研究CIK杀伤肿瘤细胞机制奠定基础。这些结果可为探讨如何培养出更具有高效杀瘤活性又能大量扩增的CIK细胞提供参考,为抗肿瘤过继免疫治疗提供一些新的思路。