黑老虎籽化学成分及其油脂降脂活性研究

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黑老虎果为聚合果,单粒果中一般含2~4粒种籽,占单粒果鲜重的7~15%。有人尝试开发利用黑老虎种籽资源,如食用、榨油等,但发现其味道苦涩,不可食用,因此除生产种苗外,一般作为废弃物丢弃。本课题经研究发现种籽可去除苦味,且味道可口,具有食用开发潜力。因此,本研究以黑老虎种籽为原料,测定其主要化学成分,通过小鼠急性毒性试验初步确定安全性;然后采用压榨法制备黑老虎籽油,测定其化学成分并对油脂进行长期毒性研究;最后采用高脂血症小鼠模型研究降脂作用,旨在为黑老虎籽深入开发利用提供科学依据。主要研究结果如下:(1)对黑老虎种籽去内种皮方法进行研究,确定沸水煮15min效果最好;去除内种皮后的黑老虎种仁完全不具苦味;采用HPLC色谱法分析种籽及种皮提取液,发现黑老虎籽中苦味成分来源于其内外种皮。(2)对黑老虎籽中主要化学成分进行含量测定,结果表明去内种皮种籽、带内种皮种籽总三萜含量分别为6.02%、6.71%;总木脂素含量分别为7.71%、9.23%;多糖含量分别为0.34%和0.38%;总蛋白含量分别为2.08%和3.28%;脂肪酸总量为27.28%和20.66%,共13种脂肪酸,其中含有5种以亚油酸为主的不饱和脂肪酸;游离氨基酸总量为0.26%和0.23%,其中6种为必需氨基酸。(3)对黑老虎籽进行急性毒性试验,结果表明去内种皮籽和带内种皮籽均未见明显毒性反应,剂量为10g/kg。(4)采用压榨法制备黑老虎籽油,并对油脂进行化学成分含量测定,结果表明,1号油脂(去内种皮种籽榨油)、2号油脂(带内种皮种籽榨油)和3号油脂(带内外种皮种籽榨油)出油率分别为40.2%、32.4%、20.0%,总三萜含量分别为15.41%、16.08%和14.85%,总木脂素含量分别为8.01%、13.75%和13.01%,维生素E含量分别为1.18mg/100g、2.11mg/100g、7.22mg/100g;三种油脂中均含有13种脂肪酸,其中5种为不饱和脂肪酸,分别占油脂质量的67.83%、56.60%和51.56%;不饱和脂肪酸中亚油酸含量最高,分别高达油脂质量的59.70%、49.83%、43.57%。(5)对黑老虎籽油进行理化指标测定,结果表明1号、2号、3号油脂酸价分别为0.39mg/g、1.90mg/g和1.80mg/g,过氧化值分别为0.09g/100g、0.04g/100g和0.04g/100g,皂化值分别为211.22mg/g、200.71mg/g、195.06mg/g,均符合《食品安全国家标准植物油》的要求。(6)参考食用植物油剂量对黑老虎籽油进行长期毒性试验,结果表明,1号油脂低剂量组(2m L/kg)、中剂量组(4m L/kg)、高剂量组(6m L/kg)均无明显毒性反应;2号、3号油脂均具有一定毒性,在低剂量(2m L/kg)时毒性表现为肝脏异常肥大,约为对照组的两倍,中(4m L/kg)、高剂量(6m L/kg)时可致小鼠死亡。(7)参考功能性油脂剂量,采用高脂血症小鼠模型,对1号和3号油脂进行降脂作用研究。结果表明,1号油脂低剂量组(150μL/kg)、高剂量(300μL/kg)组和3号油脂低剂量组(150μL/kg)均能显著降低高脂血症小鼠脂体比与肝体比;显著降低小鼠血清和肝脏组织中TC、TG、LDL-C水平,显著增加HDL-C水平;显著增加血清与肝脏组织SOD和T-AOC水平,且肝脏一般形态与肝脏组织病理学观察显示黑老虎籽油对脂肪肝有所改善。3号油脂高剂量组(300μL/kg)除肝体比、血清和肝脏组织中TC水平与模型小鼠比较无统计学差异外,其他各指标均与前三组相同。
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