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本研究以苦豆籽粕与两歧双歧杆菌作为实验的主要材料,展开新型绿色饲用微生态添加剂的研发。实验首先对两歧双歧杆菌进行耐氧驯化,驯化后采用平板计数法测定其活菌数并进行了菌的种属性鉴定;进而制作了苦豆籽粕-双歧杆菌液体合生元,通过混合培养研究其对鸡大肠杆菌和鸡白痢沙门氏菌体外抑菌试验;并采用正交试验筛选了两歧双歧杆菌微胶囊化的包被方法、材料、工艺等,最后将苦豆籽粕与微胶囊化两歧双歧杆菌混合后添加于肉仔鸡饲料中,测定其对肉仔鸡免疫功能的影响。试验将1日龄420只AA+肉仔鸡按体重随机分为6组,第Ⅰ组为空白对照组,饲喂基础日粮(不添加抗生素的基础日粮);第Ⅱ组在基础日粮上添加0.02%两歧双歧杆菌冻干菌粉,第Ⅲ组基础日粮添加2%浓度的苦豆籽粕,第Ⅳ、Ⅴ、Ⅵ组分别在基础日粮上添加0.5%、1.0%、2.0%浓度的合生元(苦豆籽粕+两歧双歧杆菌微胶囊),试验期为42天。分别于7、14、21、28、35、42日龄每组随机抽取十只剖杀,测定胸腺指数、脾脏指数、法氏囊指数、盲肠扁桃体指数,NDHI抗体效价,血液中NK细胞杀伤活性,血清中干扰素-γ的浓度和血清总胆固醇含量。结果显示:1.经过耐氧驯化后的两歧双歧杆菌活菌数为1.5×108cfu/g,种属鉴定仍为两歧双歧杆菌,且增加了耐氧特性。2. 0.5%、1.0%、1.5%、2.0%不同比例苦豆籽粕-两歧双歧杆菌液体合生元对鸡大肠杆菌和鸡白痢沙门氏杆菌体外生长均有抑制作用,与对照组相比差异极显著(P<0.01),且随合生元比例的增加抑制作用也随之增强。3.通过对几种常用微胶囊化方法筛选表明,挤压法包被两歧双歧杆菌效果较好。通过正交试验最终确定挤压法包被的最佳配方为:2.5%海藻酸钠、4.0%脱脂乳粉、2.0%氯化钙,制备的微粒大小均匀,外形光滑圆整,最大活菌数为7.67×107cfu/g。微胶囊化后的两歧双歧杆菌,其耐酸性和贮藏稳定性有了较大的提高。4.苦豆籽粕-微胶囊化的两歧双歧杆菌合生元,对AA+肉仔鸡免疫功能的影响。结果如下:①7日龄时,盲肠扁桃体指数0.5%合生元组(P<0.05)与2.0%合生元组(P<0.01)明显高于对照组。②14日龄时,盲肠扁桃体指数0.5%合生元组显著高于对照组(P<0.01);NDHI抗体效价0.5%和2.0%合生元组显著高于对照组(P<0.01);NK细胞活性1.0%和2.0%合生元组分别提高23.3%和34.3%,血液中总胆固醇含量1.0%合生元组与对照组比较提高222.3%(P<0.01)。③21日龄时,法氏囊指数1.0%合生元组和2.0%合生元组显著高于对照组(P<0.01);NDHI抗体效价1.0%合生元组的显著高于对照组(P<0.01);NK细胞活性与对照组比较, 2.0%合生元组提高8.3%;血清中总胆固醇含量0.5%合生元组(P<0.05)和2.0%合生元组显著高于对照组(P<0.01)。④28日龄时,NDHI抗体效价1.0%合生元组(P<0.05)和2.0%合生元组(P<0.01)分别显著高于对照组; NK细胞活性各实验组与对照组比较,1.0%合生元组提高2.0%;血清中总胆固醇含量1.0%合生元组(P<0.05)和2.0%合生元组(P<0.01)量显著高于对照组。⑤35日龄时, NK细胞活性各实验组与对照组比较, 0.5%合生元组、1.0%合生元组和2.0%合生元组分别提高14.9%和23.4%、12.3%;血清中总胆固醇含量各合生元组显著高于对照组, 0.5%合生元组(P<0.05)、1.0%合生元组和2.0%合生元组(P<0.01)。⑥42日龄时,盲肠扁桃体指数0.5%合生元组显著低于对照组(P<0.05);NDHI抗体效价1.0%合生元组明显高于对照组(P<0.01);血清中干扰素-γ浓度1.0%合生元组显著高于对照组(P<0.01);血清中总胆固醇含量0.5%合生元组显著低于对照组(P<0.01)。结论:1.苦豆籽粕-两歧双歧杆菌合生元能明显提高AA+肉仔鸡免疫器官指数(特别是在法氏囊指数、盲肠扁桃体指数方面)。2.苦豆籽粕-两歧双歧杆菌合生元有提高AA+肉仔鸡NDHI抗体效价的趋势。3.苦豆籽粕-两歧双歧杆菌合生元能够提高AA+肉仔鸡NK细胞活性。4.苦豆籽粕-两歧双歧杆菌合生元可以提高血清中干扰素-γ浓度5.苦豆籽粕-两歧双歧杆菌合生元具有提高血清中总胆固醇含量的功能。6.纵观整个试验结果,1.0%苦豆籽粕-两歧双歧杆菌合生元的添加剂量能够显著提高AA+肉仔鸡免疫功能,适宜于生产实践。