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性腺发育和配子发生是哺乳动物生殖的基础。性别分化前原始生殖细胞(primordial germ cell,PGC)迁移到性腺原基,雌性小鼠PGC在性别分化后增殖并进行减数分裂,出生前形成原始卵泡库,成为性成熟后卵子发生的来源,而雄性小鼠的PGC在胚胎睾丸中发育成为精原细胞,出生后经过有丝分裂、分化、减数分裂和精子形成,最终形成成熟精子。已有研究表明一些特定或关键基因的表达及相互作用调节性腺发育和配子发生过程,其中包括LIM同源盒家族转录因子。LIM同源盒家族转录因子ISL1是胚胎发育过程中重要的调控基因,但尚未见到有关ISL1调节性腺发育和配子发生的相关报道。本论文本在检测和分析ISL1在性腺发育和配子发生程中表达的基础上,构建了基因敲除小鼠模型以研究其功能。首先利用整体原位杂交(Whole-mountinsitu hybridization,WISH)和实时定量 PCR(real-time quantitative PCR,qRT-PCR)方法,检测了Isl1 mRNA在小鼠性腺发育过程中的表达。结果证明,Isl1 mRNA从胚胎期到成年持续表达,而且睾丸索内内信号明显。然后利用免疫组织化学(immunohistochemistry,IHC)方法证明ISL1在雌性和雄性小鼠生殖细胞表达,在雌性小鼠中,ISL1在卵原细胞、原始卵泡和生长卵泡中的卵母细胞以及卵子中都有表达,在雄性小鼠中,ISL1在精原细胞和精母细胞中表达,但第一次减数分裂前期细线期和偶线期的生殖细胞都不表达ISL1。ISL1的表达模式提示它可能调节了小鼠性腺发育和配子发生过程。为了进一步研究ISL1对性腺发育和配子发生的调节功能,我们建立了诱导性(inducible)和条件性(conditional)Isl1基因敲除小鼠模型。利用CRISPR/Cas9技术构建了用LoxP序列标记Isl1的转基因小鼠Isl1LoxP/LoxP,它与表达DNA重组酶(Cre)的小鼠杂交,能够在DNA水平敲除Isll基因;然后用Isll启动子控制诱导性表达Cre的Isl1MCM小鼠与Isl1/LoxP/LoxP小鼠杂交,得到基因型为IsllMCM/LoxP的小鼠,通过优化Tamoxifen灌胃给药的时间和剂量,实现Isl1基因敲除;另外,选择生殖细胞不同时期特异性表达Cre的小鼠与IsllLoxP/LoxP小鼠杂交,筛选得到的VasaCre/+;Isl1LoxP/△小鼠,其精原细胞中的Isl1基因被敲除。并利用VasaCre/+;Isl1LoxP/△小鼠模型,初步研究了生殖细胞特异性敲除ISL1对睾丸发育和精子发生造成的影响,结果显示敲除小鼠曲细精管中出现多核巨大细胞,提示ISL1参与调节生殖细胞的发育。