论文部分内容阅读
目的探讨候选抑癌基因OPCML转染人乳腺癌细胞株MDA-MB-231（MB-231）后，观察其表达对MB-231细胞增殖、凋亡、侵袭及迁移的影响。方法体外化学合成含有目的基因OPCML的质粒pcDNA3.1-OPCML作为实验组，空载体pcDNA3.1作为对照组，在Lipofectamine2000（脂质体）介导下转染MB-231细胞，利用G418二硫酸盐筛选出成功转染的细胞，构建细胞模型。通过体外细胞平板克隆形成实验、体内裸鼠移植瘤实验检测实验组及对照组MB-231细胞的增殖情况，流式细胞计数（FCM）检测两组细胞凋亡率的变化，通过Transwell侵袭实验和细胞划痕愈合实验分别检测实验组及对照组细胞侵袭、迁移的能力。之后综合分析其统计学上有无差异，以P<0.05为判断标准。结果质粒pcDNA3.1-OPCML和空载体pcDNA3.1成功转染人乳腺癌MB-231细胞，体外细胞平板克隆形成实验表明，OPCML组MB-231细胞增殖能力较对照组下降，OPCML组和pcDNA3.1转染组MB-231细胞的克隆形成率分别为：(28.67±2.52)%，(47.67±4.51)%，P<0.05。体内裸鼠移植瘤实验也表明：实验组肿瘤生长能力较对照组低，实验组肿瘤体积为：（63.77±27.07）mm3，对照组为（155.14±92.29）mm3，(P<0.05)；流式细胞仪检测细胞凋亡率显示：OPCML组MB-231细胞的凋亡率高于pcDNA3.1转染组[（21.99±1.14）%vs（15.08±1.66）%,P<0.05]；Transwell侵袭实验表明：OPCML组MB-231细胞的侵袭细胞数明显少于pcDNA3.1组和未转染组[(35.33±3.51)vs(63.26±4.36)、(61.37±8.21)]，P<0.05。细胞划痕愈合实验表明：OPCML组MB-231细胞的迁移距离(30.67±4.04)μm明显低于pcDNA3.1转染组（72.33±4.51）μm和未转染组（66.12±6.56）μm，P<0.05。结论OPCML基因的表达对人乳腺癌细胞株MDA-MB-231的增殖有抑制作用，促进其凋亡，并抑制其侵袭、迁移能力。因此，OPCML基因为一抑癌基因，可能作为乳腺癌基因治疗的一个候选靶点。