论文部分内容阅读
粘膜相关恒定T细胞(mucosal-associated lnvarlant T cells,MAIT cells)是一类主要的固有免疫样T细胞，其TCR库表达有限且恒定的的TCRα链。鼠MAIT细胞由TCRiVα19-Jα33链组成，人MAIT细胞则表达恒定的Va7.2-Ja33，人MAIT占一些器官T细胞数量的近30%。然而，小鼠MAIT细胞却是非常稀有的细胞群。与传统的αβT (cαβT)细胞不同，MAIT细胞对经典MHC分子所递呈的多肽没有应答反应，却能识别由MHC-I相关分子MR1递呈的微生物来源的核黄素（维生素B2）代谢物。MAIT细胞在胸腺中成熟分化为效应细胞并且受激动剂刺激后能够快速应答，分泌各种细胞因子和效应分子从而调节先天性和获得性免疫反应。MAIT细胞数目或功能异常与许多疾病有关，如多发性硬化症，癌症，慢性感染和自身免疫性疾病。最近，研究人员发现负载5-OP-RU的MR1-四聚体可以特异性检测小鼠MAIT细胞。从细胞发育来看，MAIT细胞的发育经过阶段一到三，在胸腺中，阶段一的MAIT细胞为CD24+CD44-，阶段二的MAIT细胞为CD24-CD44+，阶段三的MAIT细胞为CD24-CD44+。从功能上来看，MAIT细胞分化成表达IFN-γ的MAIT1和表达IL-17的MAIT17细胞，它们分别表达转录因子T-bet和RORγt。目前为止，人们对调节MAIT细胞发育和功能的机制知之甚少。 在我这篇论文中，我们假设T细胞诱导性共刺激分子（ICOS）介导的共刺激信号在MAIT细胞中发挥重要作用。ICOS是在活化的T细胞上表达的CD28超家族共刺激分子，主要表达在活化的T细胞上，与表达在B细胞、巨噬细胞或树突状细胞表面的相应配体ICOS ligand（ICOSL)相互作用。ICOS在Th分化，iNKT细胞和调节性T细胞中发挥重要作用。然而，它在MAIT细胞中的作用是未知的。为了检验该假设，我们优化了富集MAIT细胞的方法，在能清楚检测这群细胞的基础上，与未富集的细胞相比，比例提高了100-2000倍。我们发现MAIT细胞可以分为两个主要的亚群：ICOS+CD122-和ICOS-CD122+。ICOS+CD122-的MAIT细胞表达RORγt但不表达T-bet，产生IL-17，属于MAIT17细胞。相反， ICOS-CD122+表达T-bet而不表达RORγt，产生IFNγ，代表MAIT1细胞。在C57BL/6小鼠胸腺中，接近90％的MAIT细胞分化为MAIT17。我们进一步发现ICOS基因敲除小鼠阶段三的MAIT细胞在胸腺中减少了68％，而阶段一或二的MAIT细胞与野生型小鼠没有差别。此外，我们发现这种下降主要是由于RORγt+的MAIT17细胞减少引起。由于ICOS缺陷小鼠是基因组敲除，我们将野生型小鼠和ICOS-/-小鼠的骨髓细胞混合转移至受体小鼠中，构建嵌合小鼠，在嵌合小鼠中ICOS来源的MAIT细胞相比野生型小鼠来源MAIT细胞显著减少，特别是MAIT17细胞，表明ICOS在促进MAIT17分化和维持生存方面发挥着重要作用。综上所诉，我们的研究揭示可以通过细胞表面标志物ICOS和CD122分别来定义两种MAIT效应细胞MAIT17(ICOS+CD122-)和MAIT1(ICOS-CD122+)，ICOS作为重要的共刺激分子，可以选择性和内源性地促进MAIT17细胞的发育。