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目的:1.创立新生大鼠高氧肺损伤的动物模型;2.观察和比较高氧性肺损伤时实验动物肺组织病理学变化,以及通过检测高浓度氧气所致新生大鼠肺损伤中DKK1、β-连环蛋白(β-catenin)、血管内皮生长因子(VEGF)的表达,从而探讨DKK1、β-连环蛋白(β-catenin)、血管内皮生长因子(VEGF)在急性高氧性肺损伤发病机制中的作用;3.探讨DKK-1作为Wnt信号通路中的关键的抑制因子,能否通过其减少高浓度氧气对肺组织的损伤,为临床治疗高氧性肺损伤提供理论依据。方法:将36只出生一天内的新生Sprague Dawley(SD)大鼠(雌雄均可用)随机分为两组:Ⅰ组:空气组(对照组,n=18);Ⅱ组:高氧组(高氧组,n=18)。Ⅰ组新生大鼠置于空气中环境中喂养。Ⅱ组新生大鼠置于氧浓度保持在95%左右环境中喂养。每组按实验时间点分为1天、3天、7天三个亚组,并于各测试时间点随机取实验动物6只,取材检测以下指标:(1)取左肺称取湿重,然后烘干后,称取干重,计算肺湿/干重比值;(2)右上肺置于福尔马林内,择期行病理切片后,观察肺组织病理变化;(3)肺组织VEGF,β-catenin,DKK-1蛋白含量测定:在肺组织内提取对应的蛋白,使用Western Blotting方法测定其含量。结果:1.各组测试动物一般情况观察:I组中的实验动物进食状态好,生长发育正常。Ⅱ组中的实验动物逐渐出现症状,表现为皮毛颜色干枯,进食减少,脱氧后躁动,呼吸困难明显,口唇周围变紫,虽无实验动物死亡,但整体情况差。2.肺组织病理学改变:I组实验动物各时间点肺组织肺泡正常,肺泡大小一致,肺泡壁厚,肺泡腔内无液体渗出。Ⅱ组实验动物在高氧暴露3天后,肺泡腔扩大,肺泡大小不一致,肺泡壁开始变薄,肺泡数目减少。7天后可见肺组织水肿,肺泡壁明显变薄、肺泡腔扩大、结构不完整、肺泡数目明显减少。3.肺组织湿/干重比(W/D):在测试第1天、3天、7天时,Ⅱ组实验动物肺组织W/D较I组有升高(P<0.05)。4.肺组织中VEGF,β-catenin,DKK-1蛋白表达程度的变化:(1)在实验第1天,II组与I组相比,肺组织VEGF蛋白表达程度升高(P<0.05);在实验第3、7天时,II组与I组相比,肺组织VEGF蛋白表达程度下降明显(P<0.05);(2)在实验第1天,II组与I组相比,肺组织β-catenin表达程度未见明显变化(P>0.05);在实验第3天,II组与I组相比,肺组织β-catenin蛋白表达下降(P<0.05),实验第7天时,II组与I组相比,肺组织β-catenin蛋白表达程度下降明显(P<0.01)。(3)在实验第7天时,II组与I组相比,肺组织DKK-1的蛋白表达水平升高(P<0.05);在实验第1天、3天时,II组与I组相比,肺组织DKK-1的蛋白表达水平无明显变化(P>0.05)。结论:1.高氧暴露下的新生大鼠出现肺损伤,伴随着在高氧环境下的时间延长,肺损伤逐渐严重。主要病理表现为肺组织显著发育不良,肺泡壁变薄,肺泡腔扩大,结构不完整,肺泡数目减少,肺微血管发育受阻等。2.高氧肺损伤时,VEGF、β-catenin的蛋白表达水平较空气组中其蛋白表达程度下降,与肺泡结构简化程度相一致,提示VEGF、β-catenin的蛋白的表达程度的变化与急性高氧性肺损伤的形成有着重要联系。3.高氧肺损伤时,DKK-1蛋白表达程度呈上升的趋势,与肺损伤的程度相一致,提示DKK-1的表达程度在高氧肺损伤中扮演着重要的角色。