HPV16及其早期区基因E6/E7蛋白与Rb蛋白在人喉鳞状细胞癌中的表达及其相关性的研究

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[目的]近年来喉癌(laryngeal carcinoma , LC )的发病率有明显上升的趋势,约占耳鼻咽喉头颈外科恶性肿瘤的第1~2位。大量研究已表明,喉癌的发生与吸烟、饮酒、人乳头瘤病毒(human papillomavirus, HPV)感染等多种因素相关,我们以往的研究也证实了喉癌与高危型人乳头瘤病毒16型密切相关。为进一步观察HPV16及其早期区基因E6、E7与喉癌发生的相关性;观察HPV16及其早期区基因E6/E7表达蛋白与视网膜母细胞瘤(retinoblastoma,Rb)肿瘤抑制基因编码的蛋白质Rb蛋白在喉癌发生中的相关性,为喉癌的病因学探索及喉癌的早期诊断和预防提供生理学依据。我们对人喉癌组织不同病理阶段、喉癌不同病理分级和临床分期的组织标本中HPV16、HPV16 E6、HPV16 E7和Rb蛋白的表达进行检测,并以非肿瘤组织进行对照,探讨人喉癌组织中HPV16、HPV16 E6、HPV16 E7和Rb蛋白的表达与喉癌发生、发展的相互关系,研究HPV16、HPV16 E6、HPV16 E7和Rb蛋白在喉癌发生中的作用和机制,为喉癌发生、发展提供一种新的分子生物学依据,为喉癌的早期诊断和防治提供一种新的途径。[方法]选取1999年以来在我科因喉部疾患住院手术的病理标本147例,经病理证实,其中喉鳞癌82例,非肿瘤性病变53例(其中声带息肉27例,声带白斑26例),以及癌周正常组织(距肿瘤>1.5 cm)12例。82例喉鳞癌患者中,男80例,女2例,年龄38~85(平均60.55±10.65)岁,按2002年国际抗癌联盟(UICC)标准进行临床分期,其中Ⅰ期13例,Ⅱ期17例,Ⅲ期30例,Ⅳ期22例;按肿瘤分化程度将其分为3级,其中Ⅰ级(高度分化)22例,Ⅱ级(中度分化)32例,Ⅲ级(低度分化)28例。所有患者术前未经放疗和化疗。所有标本均经10%中性福尔马林溶液固定,常规石蜡包埋。采用免疫组织化学EnVision法检测组织标本中HPV16、HPV16 E6、HPV16 E7和Rb蛋白的表达情况。[结果]1、HPV16的阳性率在喉的各种不同病变、在喉癌不同分期以及喉癌不同分级中有显著性差异(P<0.05);2、HPV16 E6和HPV16 E7蛋白表达的阳性率在各种不同病变中有非常显著的差异(P<0.01),在喉癌不同分期及分级中的差别无统计学意义(P>0.05);3、HPV16 E6/E7和Rb蛋白表达的阳性率在非癌及喉癌组织中有非常显著的差异(P<0.01),HPV16 E6/E7与Rb蛋白的阳性率在非癌组织中呈明显的负相关(P<0.01);4、HPV16 E7和Rb蛋白表达的阳性率在非癌及喉癌组织中有非常显著的差异(P<0.01),HPV16的阳性率在非癌及喉癌组织中有显著性差异(P<0.05);5、喉癌组织中,Rb蛋白在HPV16和HPV16 E7阳性及阴性组中的阳性率显著不同(P<0.01),而在非癌组织中则无此现象(P>0.05);6、喉癌组织中,Rb蛋白在HPV16 E7阳性及阴性组中的阳性率显著不同(P<0.01),而在HPV16 E6和非癌组织中则无此现象(P>0.05)。[结论]1、喉癌的发生与HPV16感染后HPV16 E6、E7蛋白的表达有关;2、HPV16 E6及HPV16 E7蛋白的表达可能并非导致喉癌不同分期的原因;3、HPV16 E6及HPV16 E7蛋白的表达可能并非导致喉癌不同病理分级的原因;4、喉癌组织中HPV16 E7的高表达是导致Rb蛋白功能失活的主要原因。5、通过免疫学治疗抑制E7蛋白的表达对于喉癌的治疗有积极的意义,但其预防和治疗作用不应过分夸大。
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