菜粕固态发酵及微生物降解硫苷的研究

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菜粕来源广泛,是饲料业中的一种重要的植物性蛋白质原料;但其中的多种抗营养因子,特别是硫苷限制了它的使用。为增加菜粕在饲料中的使用比例,利用微生物来发酵菜粕,降低抗营养因子含量,提高蛋白质的利用率,是饲料工业研究的热点。本研究的主要内容和结果如下:1.通过平板透明圈法初筛、测定硫苷降解率和蛋白酶活力法复筛,筛选得到降解蛋白能力高的菌株有BL-1、JEK-X、ND-3-D、JM3;降解硫苷能力强的菌株有ND-1-1、BSK-BL-2-D、BL-1、解脂假丝酵母、BS。以硫苷浸提液为培养基的混菌组合实验表明,菌株组合BL-1+BS的硫苷降解率最高,达77%。2.以菜粕为基质进行固态发酵,得到的最佳菌株组合为BL-1+BS+解脂假丝酵母,硫苷降解率达64.6%,硫苷的残量为12.96μmol/g,单宁降解率达64.6%,酸溶性蛋白含量(TCA-N)从2.0%升至21.8%。3.为使饲料中的氨基酸配比更加均衡,本研究在单纯菜粕固态发酵基础上添加50%豆粕,即以豆粕菜粕按1:1混合为发酵基质,以TCA-N、蛋白水解度(DH)及酶切位点有效值(EV)、硫苷降解率为主要评价指标,得到菌株的最佳组合为BL-1+BS+解脂假丝酵母。通过四因素三水平正交试验,确立的最佳发酵工艺条件为料水比1:1.1,接种量9%,初始发酵温度37℃,发酵时间48h。在此条件下发酵后样品粗蛋白含量从49.5%增加到53.1%,TCA-N由2.5%升高到27.2%,硫苷降解率达65.2%。SDS-PAGE图谱显示大分子蛋白被降解为12KD以下。
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