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目的:通过对川崎病(KD)急性期血浆外泌体micro RNA(miRNA)的差异分析,了解其表达谱,进一步筛选与冠状动脉病变(CAL)相关的血浆外泌体miRNA,并探讨其临床意义;通过对KD急性期细胞因子(转化生长因子β1、肿瘤坏死因子α)的测定,了解其在KD中的变化,并分析其与miRNA表达水平的相关性,以进一步探索KD的发病机制。方法:(1)按照入组标准,选取在江西省儿童医院初次诊疗的KD急性期患儿10例,健康体检儿童5例,于治疗前抽取外周血,提取血浆外泌体总RNA,采用高通量测序技术筛选KD急性期差异表达的血浆外泌体miRNA;并检索数据库,寻找KD急性期差异表达的血浆外泌体miRNA。(2)选取KD急性期患儿40例、健康儿童20例,运用RT-qPCR验证上述结果,筛选KD急性期差异表达的miRNA。(3)选取40例KD并发CAL患儿为CAL组,40例KD非CAL患儿为NCAL组,进行血浆外泌体miRNA相对表达水平组间差异分析,进一步筛查CAL差异表达的miRNA,并建立预测CAL的风险评分模型,通过ROC曲线分析此模型对CAL的预测效能。(4)选取KD急性期患儿40例、健康儿童20例,利用ELISA方法,检测转化生长因子β1(TGF-β1)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)在KD急性期患儿与健康儿童间的表达差异,并统计分析TGF-β1、TNF-α与候选miRNA表达水平的相关性。结果:(1)测序结果显示,相较于健康儿童组,KD组血浆外泌体存在34条差异表达micro RNA;文献检索结果显示miR-1246、miR-210-5P、let-7i-3p在KD急性期差异表达(let-7i-3p与测序结果一致)。(2)根据差异表达倍数及疾病关联对上述结果中的7条miRNA进行RT-qPCR验证,结果显示miR-193a-5p、miR-203a-3p、miR-210-5p、miR-224-5p、let-7f-5p在KD中差异表达(P<0.05),且在KD组表达下调,miR-1246和let-7i-3p则无明显表达差异(P>0.05)。(3)KD并发CAL与NCAL组间差异分析显示miR-210-5p在CAL组中差异表达(P<0.05),且在CAL组相对上调,而miR-193a-5p、miR-203a-3p、miR-224-5p、let-7f-5p在两组间无明显表达差异(P>0.05)。ROC曲线显示,miR-210-5p在KD并发CAL的预测模型中曲线下面积为0.634(CI95%:0.511-0.757)。(4)细胞因子浓度测定结果显示,TGF-β1、TNF-α在KD组与健康组中差异表达,且在KD组中表达上调;统计分析结果表明TGF-β1与miR-193a-5p、miR-203a-3p、miR-210-5p、miR-224-5p表达具有负相关性,TNF-α与miR-193a-5p、miR-203a-3p、miR-224-5p表达具有负相关性,其中,miR-210-5p与TGF-β1呈中等程度负相关。结论:(1)KD急性期患儿与健康儿童间存在大量差异表达的血浆外泌体miRNA。(2)血浆外泌体miR-193a-5p、miR-203a-3p、miR-210-5p、miR-224-5p、let-7f-5p可作为KD诊断的潜在生物标志物。(3)在KD中,血浆外泌体miR-210-5p与CAL相关,未来可能作为CAL的预测指标。(4)TGF-β1、TNF-α可能参与KD的发病机制,并可能与miRNA的调控相关。