目的：抑郁症（major depressive disorder，MDD）是一种常见的精神疾病，严重危害人类身心健康。抑郁症病因错综复杂，研究表明神经炎性是抑郁症的核心病理机制之一。课题组前期研究发现circHECW2在脂多糖（lipopolysaccharide，LPS）诱导的炎症模型小鼠海马组织中表达上升，提示circHECW2可能在抑郁症病理进程中发挥一定作用。环状RNA（circular RNA，circRNA）是一类具有闭合环状结构的非编码RNA（non-coding RNA，ncRNA）分子，具有高稳定性、高保守性和组织特异性等特点，广泛参与多种生理病理过程，发挥着重要的生物学功能。课题组前期研究表明circDYM可通过抑制小胶质细胞活化，发挥抗抑郁症作用，提示circRNA参与调控抑郁症的发生发展。本研究旨在阐明circHECW2对抑郁样行为的改善作用，并探讨circHECW2对抑郁症中星形胶质细胞缺失的改善作用及其机制。
　　方法：1）应用实时荧光定量PCR（real-time quantitative PCR，qPCR）检测慢性不可预知应激（chronic unpredictable stress，CUS）模型小鼠海马组织、血浆和全血中circHECW2的表达水平；2）利用circHECW2小干扰RNA（small interfering RNA，siRNA）慢病毒敲低海马脑区circHECW2表达；3）应用糖水偏好实验（sucrose preference test，SPT）、强迫游泳实验（forced swimming test，FST）、悬尾实验（tail suspension test，TST）等行为学手段评价敲低海马脑区circHECW2后对小鼠抑郁样行为的影响；4）采用qPCR和荧光原位杂交（fluorescence in situ hybridization，FISH）技术探究circHECW2在小鼠脑中的分布和细胞定位；5）通过蛋白质免疫印迹法检测CUS模型小鼠海马中蛋白HECW2、GFAP、甲基化酶以及去甲基化酶的表达；6）采用慢病毒、质粒转染和蛋白质免疫印迹等技术探究离体水平circHECW2/WTAP/HECW2轴对CUS诱导的星形胶质细胞缺失的作用；7）通过N6‐甲基腺嘌呤（N6-methyladenosine，m6A）RNA结合蛋白免疫沉淀（RNA binding protein immunoprecipitation，RIP）以及qPCR技术检测CUS模型小鼠和过表达circHECW2的星形胶质细胞中HECW2 信使RNA（messenger RNA，mRNA）的m6A修饰水平；8）利用SRAMP在线工具预测HECW2 mRNA的m6A修饰位点，通过构建HECW2突变质粒验证甲基化酶WTAP对HECW2蛋白表达的调控作用。
　　结果：1）circHECW2在CUS模型小鼠海马组织、血浆、全血中表达升高；2）敲低小鼠海马脑区circHECW2表达可增加CUS模型小鼠糖水偏好程度，减少CUS模型小鼠在强迫游泳和悬尾实验中不动时间，改善CUS诱导的小鼠抑郁样行为；3）敲低circHECW2可逆转CUS模型小鼠海马脑区星形胶质细胞缺失；4）小鼠海马脑区脑微注射circHECW2 siRNA慢病毒和原代星形胶质细胞转染circHECW2的siRNA或过表达质粒证明circHECW2负调控HECW2蛋白表达；5）CUS模型小鼠海马脑区HECW2 mRNA m6A修饰水平降低，原代星形胶质细胞过表达circHECW2降低HECW2 mRNA m6A修饰水平；6）小鼠海马脑区脑微注射circHECW2 siRNA慢病毒和原代星形胶质细胞转染circHECW2的siRNA或过表达质粒证明 circHECW2 负调控 WTAP 蛋白表达；7 ） WTAP 介导circHECW2对HECW2蛋白表达的调控；8）WTAP通过调节HECW2 mRNA的蛋白质编码区（coding sequence，CDS）m6A修饰水平调控HECW2蛋白表达。
　　结论：本研究揭示了circHECW2调控抑郁症病理进程中星形胶质细胞缺失的关键作用和分子机制。circHECW2通过抑制m6A甲基化酶WTAP表达，降低HECW2 mRNA CDS区m6A修饰水平，进而抑制HECW2蛋白表达，最终导致抑郁症进展过程中星形胶质细胞的缺失。抑制circHECW2的表达有可能成为抑郁症治疗的潜在有效策略。