家蚕BmYippee蛋白的表达和亚细胞定位分析

来源 :浙江理工大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:safe110a
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
在对家蚕蛹期cDNA文库测序分析中,我们获得一条cDNA序列长度为127.bp,该基因的开放阅读框(ORF)全长36.bp,编码121个氨基酸残基,预测分子量为13.7.kD,等电点为5.91并且具有一个保守的Yippee结构域。我们将它命名为家蚕Yippee蛋白BmYppee(Yippe.fro.Bomby.mori),Genbank登录号为DN236885,我们将其ORF克隆到原核表达载体pET-28a中,构建重组质粒,双酶切鉴定及序列测定正确后转化大肠杆菌BL21(DE3),经IPTG诱导表达的重组蛋白以包涵体形式存在,经过镍柱亲和层析纯化后获得高纯度的目的蛋白His-BmYippee,以该重组蛋白作为抗原免疫新西兰大白兔制备多克隆抗体,经ELISA检测,抗体效价可达1:8000,Wester.blotting结果显示抗体的特异性较好。   提取家蚕各个时期和五龄幼虫各组织的总RNA分别进行荧光定量PCR分析结果表明,家蚕发育时期在蛹期转录水平最高,卵中最低;五龄幼虫时期在生殖腺中转录水平较高,丝腺和脂肪较低。提取家蚕各发育时期以及家蚕五龄幼虫各组织蛋白进行Wester.blotting分析,结果表明,BmYippee蛋白在家蚕蛹中及五龄幼虫的生殖器、气管、马氏管中表达较高。   亚细胞定位结果表明,在Bm5细胞的细胞间期BmYippee在细胞核和细胞质中均有分布,而细胞分裂期时在某些区域有相对集中的分布。
其他文献
吉林省中部地区是吉林省人口最密集,经济最发达的地区。本文深入和细致分析了该地区水资源开发利用程度、节水潜力、供需平衡,得出受水区水资源贫乏,属于严重资源型缺水地区。为
滨海水域受工业废水和生活废水的注入而引起的水环境问题已不可忽视。同时,由于河口淡水流量的减少,促使海水盐度增加,同样也引起了水域水环境的恶化。这不仅影响着河口地区
首先,本文以预应力简支梁为例,分析了预应力在梁的横向振动过程中的变化,建立了预应力梁横向弯曲振动的微分方程。采用模态摄动法,进一步推导出预应力梁模态特性的近似分析方法,把
学位
  我国桩基设计规范采用的m法,属于线性弹性地基反力法,而桩土相互作用极为复杂过程,具有较大局限性,本文将p-y曲线法用于风电塔桩基础计算,并结合海上风电塔的现场监测,与
会议
摘要:英语语言是目前国际交流的重要语言之一,随着全球化的日益发展,英语的应用受到了全世界人们的关注。英语是我国教育中的重要课程,尤其是新课改之后,高中英语教学更加重视学生实际应用能力的提高,这已成为高中英语教学的重要目标,旨在促进学生更加全面地发展。在本文中,笔者分析了新课改背景下高中英语教学的困境,并提出了改善的策略,以期对高中英语教学的发展有所借鉴。  关键词:新课改;高中英语;困境;对策  
建设项目论证是进行项目可行性研究的主要组成部分,可行性研究是运用多种科学成果,对一项工程在建设投资决策前进行技术经济论证的一门综合性学科。大通河甘肃省河段水电梯级开发建设项目是发展甘肃经济的一个主要开发项目,不仅项目本身能带动全省经济的发展,也能解决目前制约全省经济进一步发展的电力不足的矛盾。本项目的开发时间长,开发难度较大,影响的区域广。该项目是在国家西部大开发战略下,由甘肃省及...
  结构模态参数识别是对结构施加激励,采集结构上关键点的响应,分析激励和响应间传递函数以提取出结构本身固有频率、阻尼比、振型等模态参数。当前,模态参数识别方法均是基于
会议
  通过对堆石料开展高应力状态的静力三轴试验,研究了孔隙率、级配及应力状态对其力学特性指标的影响。试验结果表明:随着堆石料孔隙率的降低以及级配的改善,堆石混合料的力学
会议
目前粉煤灰非饱和特性的工程描述多参考与其粒经类似的粉土,但两者由于颗粒级配和颗粒微观结构的不同,其工程非饱和特性方面的差异必然是存在的,目前尚没有见到这方面的研究
会议
现代混凝土面板堆石坝筑坝技术是现代坝工建设领域取得的一项具有重大意义的技术成就。随着近几年我国在建或拟建的混凝土面板堆石坝的数量大大增加,一些新的设计思路和先进