短枝型苹果‘苏帅’赤霉素相关差异基因的筛选与表达分析

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苹果(Malus×domestica Borkh.)属于木本落叶果树,是蔷薇科中经济价值较高的植物,为全球栽培面积最大的果树树种之一。以苹果品种’印度’为母本,’金冠’为父本获得杂交品种’苏帅’,与其亲本相比,’苏帅’植株生长健壮,树冠紧凑,枝条粗壮,节间较短,叶片大而叶色浓绿等特点。本研究测定了’苏帅’、’金冠’和’印度’不同处理前后三个品种的叶片内源激素含量;比较了’苏帅’和其亲本在不同处理下一年生枝细胞长度和节间长短及变化,并研究了叶片光合气体交换参数;同时根据重测序结果及生物信息学分析,筛选出’苏帅’中18个存在非同义突变的赤霉素信号转导通路和代谢相关差异基因,并分析了它们在不同品种和不同处理之间的表达差异。主要研究结果如下:1.4苏帅’苹果的一年生枝细胞长度极显著小于’金冠’和’印度’;’苏帅’内源激素脱落酸(ABA)、赤霉素(GA)、吲哚—3—乙酸(IAA)、玉米素核苷(ZR)与4金冠’、’印度,相比均呈现显著差异。与’金冠’、’印度’叶片相比,’苏帅’叶片的净光合速率、气孔导度、胞间CO2和蒸腾速率均极显著低于其亲本。’苏帅’中与赤霉素-2-β-双加氧酶8(GA2ox8)同源基因MDP0000309451的表达量显著高于其亲本,而与赤霉素-3-β-双加氧酶4((GA3ox4)同源的MDP0000196102在’苏帅’中的表达低于其亲本且差异显著;同源于GRAS结构蛋白的MDP0000287040和MDP0000284679基因在’苏帅’中的表达量显著高于其亲本。’苏帅’中KNOX的同源基因MDP0000166587的表达量显著高于其亲本。2.外源GA3的喷施,使得’苏帅’叶片中内源GA3含量先升高后降低,ABA含量高于对照处理,IAA含量提高,ZR含量略高于对照处理;GA3/ABA、GA3/IAA、GA3/ZR比值较对照高。赤霉素处理后,三个品种的枝条节间长度均有增长,其中’苏帅’枝条伸长程度最大,与对照相比伸长了 90.05%,’印度’和’金冠’枝条分别伸长了 22.50%和17.90%。赤霉素处理提高了’苏帅’叶片的气孔导度,降低了胞间CO2浓度,极显著提高了净光合速率,但是’印度’和’金冠,’叶片的净光合速率没有显著变化;’苏帅’中与GA3ox4同源的MDP0000196102基因在赤霉素处理后表达量上调,同源于GA2ox8的MDP0000309451基因表达水平持续降低,同源于GRAS家族的MDP0000287040和MDP0000284679基因的表达量显著下降,同源于KNOX的MDP0000166587基因的表达量先下调后升高。以上这5个基因很有可能通过单独作用或者互相作用来影响’苏帅’中赤霉素的含量,从而改变其树体结构。3.在外源PP333的处理下,’苏帅’叶片中内源GA3的含量降低,ABA含量先降低后升高,降低了’苏帅’叶片的IAA和ZR的含量;GA3/ABA和GA3/ZR的比值均比对照的低,而GA3/IAA比值比对照的高。多效唑喷施后,三个品种的枝条节间长度均缩短,与对照相比分别缩短了 10.35%、21.37%和26.44%。多效唑处理极显著提高了’苏帅’叶片的气孔导度,降低了胞间CO2浓度和蒸腾作用,提高了净光合速率,光合速率值为对照的110.83%;并且我们发现’苏帅’中,同源于赤霉素合成酶的MDP0000196102基因表达上调,同时同源于赤霉素代谢酶基因的MDP0000309451表达量明显的变低。’苏帅’中同源于GRAS家族的MDP0000284679基因的表达量先升高后下降,表达模式也跟’苏帅’中内源赤霉素含量先降低后升高的表现相对应。结果说明,同源于GA3ox4、GA2o8x和GRAS家族的基因 MDP0000196102、MDP0000309451 和 MDP0000284679在’苏帅’短枝性状的机制中可能发挥着重要的作用。
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