人表皮生长因子双位点突变体在甲基营养型酵母Pichia pastoris中的表达、纯化和性质研究

来源 :中国协和医科大学 北京协和医学院 中国医学科学院 清华大学医学部 | 被引量 : 0次 | 上传用户:tujiangbo110
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表皮生长因子(Epidermal growth factor, EGF)于20世纪60年代初首先在鼠的颌下腺提取物中被发现,1975年从人尿中纯化出的抑胃肽后来证实是人表皮生长因子.随着对EGF基础研究的深入,EGF广泛的应用价值已为大家所接受.这需要找到一种简便、廉价的大规模生产方法,来满足对EGF的临床乃至日常需要.在此基础上,我室积极与中科院生物物理所合作,进行EGF结晶与衍射方面的研究,并取得了一定进展.随后我们又合作利用定点突变的方法对EGF的结构与功能关系进一步研究.由我承担这个工作的一部分.所选取的两个突变位点的单位点突变体据报道均较野生型EGF活性为高;但点突变体在国内外未见报道.根据有限的资料,我们知道双位点突变体的活性大致相当于两个单位点突变体的活性之积--这就是所谓的"累加效应".我们所确定的突变体的目的有二:其一,改善EGF结晶条件、得到质量更好的晶体;其二,获得稳定性更好、活性更高的EGF.
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