【摘 要】
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目的探讨色素上皮衍生因子(pigment epithelium-derived factor,PEDF)和αB-晶状体蛋白在人晶状体上皮细胞(lens epithelial cells,LEC)中的表达,及其与糖尿病视网膜病变(diabetic retinopathy,DR)的关系,为糖尿病患者白内障手术后发生虹膜新生血管的机制探讨提供理论依据。方法收集年龄相关性白内障患者术中所取的晶状体前囊膜,
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目的探讨色素上皮衍生因子(pigment epithelium-derived factor,PEDF)和αB-晶状体蛋白在人晶状体上皮细胞(lens epithelial cells,LEC)中的表达,及其与糖尿病视网膜病变(diabetic retinopathy,DR)的关系,为糖尿病患者白内障手术后发生虹膜新生血管的机制探讨提供理论依据。方法收集年龄相关性白内障患者术中所取的晶状体前囊膜,根据患者是否合并糖尿病,分为非糖尿病(non diabetes mellitus,NDM)组和糖尿病(diabetes mellitus,DM)组两组。DM组通过眼底检查,再分为:无糖尿病视网膜病变(non diabetic retinopathy,NDR)组、非增殖性糖尿病视网膜病变(non proliferative diabetic retinopathy,NPDR)组和增殖性糖尿病视网膜病变(proliferative diabetic retinopathy,PDR)组。采用免疫荧光法(immunofluorescence)和蛋白质免疫印迹技术(western blot,WB)分别检测PEDF蛋白和αB-晶状体蛋白在LEC中的分布和表达。结果(1)免疫组织荧光法显示:各晶状体前囊膜样本中,中央区LEC多呈规则的单层立方上皮且贴附于晶状体前囊内表面。荧光显示PEDF和αB-晶状体蛋白均存在于LEC中,PEDF主要分布在细胞质中,而αB-晶状体蛋白存在于细胞质和细胞核中。(2)伴随DR的发生和进展,LEC中PEDF蛋白表达水平逐渐增加,尤其在PDR组,PEDF蛋白表达水平较其余三组显著增加(P<0.001)。(1)在各样本组织的等量蛋白中,PEDF的表达量可见显著的组间差异(P<0.01);(2)随着DR的出现和进展,各组LEC中PEDF蛋白的相对表达量分别为0.31±0.24(NDM组)、0.27±0.23(NDR组)、0.81±0.46(NPDR组)和2.19±0.39(PDR组),随着DR的出现和进展,呈现明显的上升趋势(P<0.05);(3)LEC中αB-晶状体蛋白的表达水平随着DR的出现和进展,亦呈上升趋势(P<0.01)。(1)在各样本组织的等量蛋白中,αB-晶状体蛋白的表达量可见显著的组间差异(P<0.05);(2)各组LEC中αB-晶状体蛋白的相对表达量分别为2.17±0.97(NDM组)、2.60±1.12(NDR组)、3.50±1.43(NPDR组)和4.59±1.19(PDR组),随着DR的出现和进展,呈现明显的上升趋势(P<0.05);结论人LEC中存在PEDF蛋白和αB-晶状体蛋白表达,两者的表达水平随DR的进展呈上调趋势,提示晶状体可通过新生血管相关因子的表达参与新生血管生成的调节,糖尿病患者白内障术后虹膜新生血管的形成可能与此调节有关。
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